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目的:宫颈癌是世界上常见的恶性肿瘤之一,在女性恶性肿瘤中排名第四位,而且在年轻女性中有发病率增加的趋势。已有大量研究表明,宫颈癌的发生与HPV感染相关,但随着对宫颈癌研究的深入,人们发现microRNAs(miRNAs)也能够参与宫颈癌的发生发展过程中。miRNAs是长度大约为22nt的单链非编码RNA,能够通过与mRNA3’UTR的结合来抑制其翻译或降解其mRNA,达到调节体内靶基因表达的目的,通过上述过程,miRNA参与调节与肿瘤发生相关的增殖、迁徙、转移和凋亡等多个过程。已有文献报道,宫颈癌的发生伴随着多种miRNAs表达谱的异常改变,暗示着miRNAs可能与宫颈癌的发生相关。已发现miR-429在许多肿瘤中表达下调,并具有抑制肿瘤增殖和诱导凋亡的作用,但在宫颈癌中的作用还不清楚。因此本研究旨在探讨miR-429在宫颈癌中细胞中的作用,及其发挥作用的分子学机制,为更好的研究宫颈癌发生的分子学机制提供新的基础。方法:首先我们通过RT-qPCR实验检测了15对宫颈癌组织中miR-429的表达水平,然后通过MTT实验、集落实验和凋亡实验检测了miR-429对宫颈癌细胞系HeLa和C33A细胞增殖和凋亡的影响。接下来我们利用生物信息学方法,通过miRBase Targets、TargetScan和PicTar等靶基因预测软件,筛选出IKKβ作为miR-429的靶基因,随后我们构建了包含IKKβ3’UTR的野生型和突变型序列的EGFP报告载体,然后通过荧光报告载体实验证实miR-429靶定IKKβ并下调其表达,接下来,我们还通过Real-time PCR和western blotting实验分别从mRNA水平和蛋白水平证实了二者的靶定关系,另外,还通过RT-qPCR实验检测了15对宫颈癌组织中IKKβ的表达水平,并对宫颈癌组织中miR-429和IKKβ进行了相关性分析。为了深入研究miR-429和IKKβ的关系和靶基因IKKβ的功能,构建了IKKβ过表达和敲降质粒,并且通过MTT实验、集落实验和凋亡实验证实IKKβ具有促进宫颈癌细胞He La和C33A增殖和抑制细胞凋亡的功能。最后,通过挽救实验来证实miR-429对宫颈癌细胞增殖和诱导凋亡的影响是由IKKβ介导实现的。结果:与癌旁正常组织相比,在宫颈癌组织中miR-429表达下调。过表达miR-429能够抑制宫颈癌细胞HeLa和C33A的增殖能力并诱导其凋亡。利用miRBase Targets、TargetScan和Pic Tar等生物信息学软件预测IKKβ的3’UTR区域存在miR-429的结合位点。通过荧光报告载体实验证实miR-429直接靶定IKKβ并下调其表达,Real-time PCR和western blotting实验也分别从mRNA水平和蛋白水平证实了二者的靶定关系。在宫颈癌组织中IKKβ表达上调且与miR-429呈负相关关系。在宫颈癌细胞HeLa和C33A中,IKKβ发挥促进细胞增殖和抑制凋亡的作用。挽救实验证实IKKβ介导了miR-429对宫颈癌细胞的增殖能力和凋亡的影响。结论:本篇文章首次发现在宫颈癌细胞系HeLa和C33A中miR-429通过靶定并下调其靶基因IKKβ的表达来发挥抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,为深入研究宫颈癌发生的分子学机制提供了新的基础。