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[目的]1)通过检测小白菊内酯对小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症相关基因表达、细胞因子表达的影响,探讨小白菊内酯单体及负载小白菊内酯复合纤维膜的体外抗炎效果,明确小白菊内酯及负载小白菊内酯复合纤维膜的抗炎作用;2)通过研究小白菊内酯单体及负载小白菊内酯复合纤维膜对RAW264.7内NF-κB和MAPKs信号通路上相关蛋白磷酸化的改变,探讨小白菊内酯对炎症信号通路信号传导的影响,进一步明确小白菊内酯的抗炎作用机制。3)通过丝线结扎建立大鼠实验性牙周炎模型,结合外科手术方法建立牙周组织缺损模型,为后续小白菊内酯支架材料体内抗炎效果的研究进行建模预实验。通过Micro-CT扫描对建模情况进行评估,制定实验标准,完成大鼠实验性牙周炎模型和牙周组织缺损模型的建立。[方法]1)小白菊内酯单体体外实验体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,实验分为三组:DMSO+LPS组,小白菊内酯 10μM+LPS 组,Bay11-7082(NF-кB 抑制剂)10μM+LPS 组。根据分组加入DMSO,小白菊内酯,Bay11-7082处理细胞1hr后,加入E.coli LPS(100ng/mL)。培养4hrs,8hrs后,提取细胞提取细胞总RNA,通过qRT-PCR技术检测 IL-6,TNF-α,IL-1β,IL-10,Ptgs2,MMP13,NOS2mRNA 的表达水平;培养24hrs,48hrs后,收集细胞上清液,通过ELISA技术检测IL-6,TNF-α表达情况;培养0,15,30,60,120min后,提取细胞总蛋白,通过Western blot 技术检测 Phospho-p65,Phospho-p38,Phospho-ERK,Phospho-JNK表达水平的改变。2)负载小白菊内酯复合纤维膜体外实验体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,实验分为DMSO+LPS组,空白复合纤维膜+LPS组,负载小白菊内酯复合纤维膜+LPS组。根据分组加入DMSO,空白复合纤维膜,负载小白菊内酯复合纤维膜处理细胞7d后,加入E.coli LPS(100ng/mL)。培养4hrs,8hrs后,提取细胞提取细胞总RNA,通过qRT-PCR技术检测 IL-6,IL-6,TNF-α,IL-1β,IL-10,Ptgs2,MMP13,NOS2;培养24hrs,48hrs后,收集细胞上清液,通过ELISA技术检测IL-6,TNF-α表达情况;培养15,30,60,120min后,提取细胞总蛋白,通过Western blot技术检测 Phospho-p65,Phospho-p38,Phospho-ERK,Phospho-JNK 表达水平的改变。3)大鼠实验性牙周炎模型和牙周组织再生模型建立及评价10%水合氯醛麻醉SD大鼠,丝线结扎大鼠右下颌第一磨牙,一周后,显微镜下由口外入路,通过手术方法在右侧下颌第一和第二磨牙颊侧根方牙槽骨形成3*2*1(长*宽*深)mm3的牙槽骨缺损,小心剥除缺损区域牙根面的牙周韧带、牙骨质和浅层牙本质。于2周后处死大鼠,收集大鼠左右侧下颌骨,通过Micro-CT扫描观察大鼠实验性牙周炎模型和牙周组织缺损模型的建模情况。[结果]1)与DMSO组比较,小白菊内酯单体预处理的RAW264.7细胞,在LPS刺激4hrs,8hrs 后,IL-6,TNF-α,IL-1β,IL-10,Ptgs2,MMP13,NOS2mRNA表达水平明显降低(P<0.01);细胞因子IL-6,TNF-α的表达量也明显降低(P<0.01);Phospho-p65,Phospho-p38,Phospho-p44/42,Phospho-JNK 蛋白的表达均被抑制(p<0.05);2)与DMSO组、空白复合纤维膜组比较,负载小白菊内酯复合纤维膜预处理的RAW264.7细胞,在LPS刺激后,负载小白菊内酯复合纤维膜组IL-6,TNF-α,IL-1β,IL-10,Ptgs2,MMP13,NOS2 mRNA 表达水平明显降低(P<0.01);细胞因子TNF-α的表达量也明显降低(P<0.01);Phospho-p65,Phospho-p44/42,Phospho-JNK蛋白的表达被抑制,但Phospho-p38蛋白的表达升高(p<0.05);3)Micro-CT扫描显示大鼠右侧下颌第一磨牙牙根中上1/3暴露,3*2*1(长*宽*深)mm3的骨缺损位于第一磨牙远中颊根和第二磨牙颊根之间的区域。[结论]1)小白菊内酯及负载小白菊内酯复合纤维膜用于牙周抗炎治疗基因调控方面的机制可能是:a)抑制致炎因子IL-6,TNF-α,IL-1β的表达;b)抑制IL-10的表达;c)降低Ptgs2的表达从而抑制PGE2的分泌;d)抑制MMP13的表达;e)抑制NOS表达,使NO分泌量降低;2)小白菊内酯单体对NF-кB和MAPKs信号通路蛋白的磷酸化水平均有下调作用,从而阻断炎症信号通路的传导,达到抗炎的目的;3)负载小白菊内酯复合纤维膜对NF-кB信号通路有抑制作用,对MAPKs信号通路有一定的抑制作用。4)成功构建大鼠实验性牙周炎模型和牙周组织缺损模型。