目的： 探讨一氧化氮合酶/一氧化氮(NOS/NO)和血红素加氧酶/一氧化碳(HO/CO)在正常大鼠三叉神经系统中的表达和分布，以及在大鼠慢性牙髓炎症性疼痛中可能的作用机制，同时探讨了在慢性牙髓炎症疼痛中小胶质细胞的可能作用。 材料与方法： 实验Ⅰ：健康成年雄性Sprague—Dewley(SD)大鼠5只，灌注取材。取三叉神经节(TG)，三叉神经中脑核(MTN)，三叉神经脊束核(STN)，冰冻切片，NADPH—d组织化学(NOS标志物)，HO—2免疫组织化学及组化和免疫组化双标，光镜分析NADPH—d和HO—2在正常大鼠三叉神经系统中的表达和分布。 实验Ⅱ：成年雌性SD大鼠35只，通过上颌第一磨牙牙本质进行荧光金(FG)逆行标记TG神经元后，随机分成7组，建立3型牙齿损伤模型，假手术组作为对照组，持续露髓(PX)1d，3d，7d，14d，21d和28d作为实验组。预定时间取材，应用组织化学和免疫组织化学的方法测定大鼠TG(FG标记的神经元)、三叉神经尾侧亚核(Vc)的NADPH—d表达和分布，测定Vc的c—Fos的(神经元激活标志物)表达，露髓牙齿进行HE染色，光镜分析牙齿损伤程度。 实验Ⅲ：模型制作和分组同实验Ⅱ，用HO—2免疫组织化学的方法测定大鼠TG(FG标记的神经元)和Vc的HO—2表达和分布。 实验Ⅳ：模型制作和分组同实验Ⅱ，用OX—42作为小胶质细胞的标志物，采用免疫组织化学的方法测定大鼠Vc小胶质细胞的变化。 结果： 1.正常大鼠NOS/NO和HO/CO在三叉神经系统中的表达分布 NADPH—d染色：TG大多数神经元被NADPH—d染色，染色较强的主要是小—中型神经元，而大型神经元染色较弱。HO—2免疫组化显示几乎所有的TG神经元染色阳性，但它们无细胞大小染色强度的变化。在MTN均观察到NADPH—d和HO—2阳性神经元，它们具有相似的分布模式—即从MTN尾侧端至吻侧端NADPH—d活性和HO—2表达逐渐下降。双染显示NADPH—d/HO—2共存的神经元在TG和MTN分别占97.3％和97.6％。Vc部分：NADPH—d深染的神经元胞体，散在分布，在Vc区的HO—2神经元广泛分布于浅层和深层，在数量上浅层比深层的HO—2神经元多；三叉神经极间亚核(Vi)部分：NADPH—d神经元数量比尾侧亚核相比要少，散布于整个核团染色较弱，HO—2在整个Vi的表达都较强，分布广泛；三叉神经吻侧亚核(Vo)部分：只有少数浅染色的NADPH—d神经元，散落于吻核的大部。HO—2神经元比NADPH—d神经元分布广泛。NADPH—d和HO—2双染显示：STN中所有NADPH—d神经元均HO—2阳性。 2.NOS/NO参与大鼠慢性牙髓炎症疼痛发展 PX处理后，牙髓炎性损伤渐进性破坏牙髓从牙髓组织的上部到牙根尖部，引起进行性牙髓坏死和丢失，到4周时，炎症可扩大到牙周韧带和牙槽骨。定量分析显示在PX大鼠在处理后7，14，21和28天，在TG，FG标记小和中型神经元的NADPH—d活性明显比对照组强(p<0.05)。PX处理的各组大鼠FG标记的大型神经元与对照组比无显著性差异，PX后1、3天组，与对照组相比无显著变化(p>0.05)。在Vc，PX后，损伤侧NADPH—d神经元在7，14，21和28天明显增多Vc的laminaⅠ/Ⅱ为显著(p<0.05)，Vc的laminaⅢ/Ⅳ阳神经元与NADPH—d染色的神经纤维增多，对侧Vc在14-28天的阳性神经元明显增多(p<0.05)。正常对照组c-Fos表达若或无表达。PX各组1-28天，c-Fos在PX同侧Vc均有表达，并且是逐渐增加(p<0.05)。在PX7，14，21和28天，损伤对侧Vc可见一些c-Fos阳性神经元，但数量明显少于对侧。 3.HO-2/CO参与大鼠慢性牙髓炎症疼痛机制 在TG，定量分析显示在PX大鼠在处理后，各组大、中和小型神经元的HO-2活性与对照组相比均无显著变化(p>0.05)。在Vc，PX后1-14天，损伤侧的HO-2表达，各组与对照组相比无显著变化(p>0.05)，在21和28天明显增多Vc laminaⅠ/Ⅱ为显著(p<0.05)，以Vc laminaⅠ/Ⅱ的中、小神经元染色增强，并且在laminaⅠ-Ⅱ，非胞体神经纤维网状结构染色增强，对侧Vc在28天的HO-2表达增强(p<0.05)。 4.慢性牙髓炎诱导小胶质细胞激活 应用免疫组织化学的方法，我们测定在PX后1-28天，Vc的小胶质细胞激活。在对照组、1、3、7-天组，可见低水平的OX-42免疫活性。在PX后14天，可见损伤侧Vc小胶质细胞激活，在PX-21和28天，同侧Vc的OX-42免疫反应性显著增加达到高峰(p<0.05)。只在PX-21，28天，损伤对侧的Vc可见小胶质细胞的激活(p<0.05)。 结论： 1.NADPH-d和HO-2在TG、MTN和STN广泛表达并且共存，表明NO和CO可能在口腔颌面部感觉中共同起作用。 2.NOS/NO参与慢性牙髓炎症伤害感受信息处理的过程，在一级神经元水平和中枢水平可能起促进作用。 3.HO-2/CO参与慢性牙髓炎症伤害感受信息处理的过程，可能在中枢水平起作用。 4.慢性牙髓炎症可诱导中枢小胶质细胞的激活，可能是慢性牙髓炎症持续疼痛的中枢机制之一。