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纹枯病菌(Rhizoctonia solani)和禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)是禾本科作物的重要病原菌,其引起的水稻纹枯病等菌核病和小麦赤霉病等病害每年产生的损失巨大,危害十分严重。乙酰乳酸合成酶(Acetolactate synthase, ALS)是植物和微生物体内三种支链氨基酸生物合成过程中影响第一阶段的关键性酶,但并不存在于动物体内,其作为一种重要的除草剂靶标已被广泛证实和应用,但对于真菌ALS的研究甚少。本文旨在探索以ALS为靶标开发纹枯病菌和禾谷镰刀菌病害防治药剂的可能性。研究结果如下:1.选取两种植物病原真菌纹枯病菌、禾谷镰刀菌和两种植物水稻(日本晴)、油菜(上海四月慢)为实验材料,进行ALS制备研究。在借鉴前人研究方法和经验的前提下,本试验从病原菌接种方法、接种时期、粗酶提取、酶活性测定等四个ALS活性鉴定的关键环节入手,总结了一套可用于真菌及植物ALS活性和离体化合物抑制的测定方法,为进行ALS活性特异性研究、ALS抑制化合物筛选研究等提供了良好的基础和借鉴。2.利用根据已有ALS抑制剂结构特点设计合成的31种嘧啶氧苄胺类化合物,以双草醚为对照,测定了100ppm浓度下它们对水稻、油菜、纹枯病菌和禾谷镰刀菌ALS的抑制效果,结果发现同一化合物对不同ALS的作用效果存在差异:能抑制纹枯病菌ALS活性的有6种,能抑制禾谷镰刀菌ALS活性的有10种,能抑制水稻ALS活性的有12种,能抑制油菜ALS活性的有8种。仅对一种生物类型ALS产生抑制作用的有11种,能对两种生物类型ALS产生抑制作用的有4种,能对三种生物类型ALS产生抑制作用的有3种,对四种ALS均能产生抑制作用的有2种。能抑制多种生物类型的化合物对不同类型的ALS的抑制率存在差异。3.通过100ppm浓度下31种化合物对纹枯病菌和镰刀菌生长的抑制效果分析,发现对纹枯病菌生长有较明显抑制作用的有27种,对禾谷镰刀菌生长有较明显抑制作用的有11种。比对待测化合物对两种真菌ALS和对菌丝生长的抑制率,发现两者之间存在差异。能抑制纹枯病菌生长而对其ALS无明显作用的化合物有22种,能抑制纹枯病菌ALS而对其菌丝生长无明显作用的有1种,对ALS和菌丝生长均能抑制的有5种;能抑制禾谷镰刀菌生长而对其ALS无明显作用的化合物有5种,能抑制禾谷镰刀菌ALS而对其菌丝生长无明显作用的有4种,均能抑制ALS和菌丝生长的有6种。4.对其中的化合物12#进行不同浓度的抗菌活性测定,发现该化合物浓度与对镰刀菌生长的抑制率呈正相关。对ALS的抑制测定,结合菌体抑制测定可作为抑菌化合物的初步筛选,这为进一步开发以ALS为靶标的纹枯病、赤霉病等病害防治药剂提供了有益的依据。根据本研究的31种供试化合物的结构特点和作用效果,有针对性地设计新的化合物,并进行生物学分析,有望获得针对纹枯病菌、禾谷镰刀菌的高效选择性杀菌化合物,为开发新型的安全高效杀菌剂提供一条新的思路。