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本论文以富含胶原蛋白的鱼下脚料主要是鱼鳞为原料,主要进行了以下两个方面的研究工作:
(1)从鱼鳞中提取海洋胶原多肽,将胶原多肽与钙金属元素进行螯合,制备纳米胶原多肽螯合钙,并研究其理化性质。
(2)选择合适的纳米药物载体,将胶原多肽螯合钙粒子进行有效的包埋,制备成较稳定的核壳型纳米胶原多肽螯合钙,并对其理化性质进行初步的研究。
获得了如下的研究成果:
1.采用简单的化学方法并结合膜分离技术制备了纳米胶原多肽螯合钙粒子,最佳的螯合条件为用1M无机酸水解鱼鳞提取胶原多肽,常温搅拌螯合反应24 h。制备的胶原多肽螯合钙采用膜分离纯化,纯化后的蛋白含量为50.86%,钙含量为13.08%,硫酸根含量为30.41%。通过SDS电泳可以看出,胶原多肽螯合钙的分子量在6.5 KDa~17.2 KDa之间。纳米胶原多肽螯合钙粒子为类球形,粒径在100~500nm之间,当pH4~8时粒子比较稳定。纳米胶原多肽螯合钙粒子的等电点在pH2.6附近,当pH>2.6时,粒子表面所带的为负电荷,当pH<2.6时,粒子表面所带的为正电荷。
2.在水相中使用简单的方法,在胶原多肽螯合钙粒子的表面形成一层极薄的海藻酸盐不溶性膜,制备出小于1μm的核壳结构胶原多肽螯合钙纳米粒子。核壳结构海藻酸盐/胶原多肽螯合钙纳米粒子的最佳制备条件是:取一定体积的0.01~0.1 g/ml胶原多肽螯合钙水溶液和0.01~0.1 mol/L可溶性钙离子水溶液混合均匀,调节pH6.8~7.2,将此混合溶液缓慢滴加到相同pH的0.1~1 g/L海藻酸钠溶液中,整个过程不断搅拌使其反应充分,滴加完毕后,再继续搅拌30~60 min,即得到核壳结构的胶原多肽螯合钙纳米粒子。核壳结构胶原多肽螯合钙纳米粒子为类球形,表面光洁,分散较为均匀,海藻酸盐壳层厚度约为100nm,复合粒子的粒度范围约为350~1000nm。