本研究从重庆地区分离和鉴定了猪繁殖与呼吸综合征病毒,并对分离病毒的M蛋白基因进行了克隆和序列分析。试验对疑似为PRRS病猪的病料采集处理后,接种Marc-145细胞进行病毒培养,从病料中分离了一株PRRSV,命名为C14-2。试验对分离病毒进行了鉴定,电镜观察结果可见胞浆内散布大量呈球形的病毒粒子,直径为40-60nm;病毒的TCID₅₀为10^-5.70/0.1ml:病毒为RNA病毒;C14-2株经56℃处理20-30min后丧失对细胞的感染力;病毒培养的最佳PH值是6.8-7.0;分离病毒能够被美洲型的PRRSV标准阳性血清所中和,其中和指数为1:27;病毒动物回归试验表明,分离病毒接种40日龄的仔猪,临床表现体温升高和一定程度的呼吸症状。 试验设计了PRRSV M蛋白基因引物,对C14-2株的M基因进行了RT-PCR扩增,扩增出约550bp的基因片段。试验对扩增的M基因以PMD18-T载体进行克隆,筛选获得重组质粒PMD-M,对重组质粒进行序列测定,结果显示C14-2M基因全长525bp,编码174个氨基酸。将C14-2的M基因序列与其他分离株进行同源性比较,结果显示重庆分离株C14-2与美洲株VR2332的M蛋白基因序列及推导的氨基酸序列同源性分别高达99.8%和99.4%;但与欧洲毒株LV的同源性分别为68.6%和78.2%。这在分子水平上确定了C14-2在基因型上与美洲型毒株更为接近,与欧洲型毒株相差较远。由此进一步证实了重庆地区存在美洲型PRRS流行。