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阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种慢性神经退行性疾病,患者临床表现为认知和记忆能力受损,进而影响视力,听觉甚至行动能力。目前AD的发病机制尚未完全清楚,Aβ淀粉样蛋白中的氨基酸肽Aβ1-42在患者脑中的异常聚集是该疾病发病进程中的主要原因。迄今为止,临床上仍然没有治疗AD发病的有效药物,因此,设计和筛选有效对抗AD的药物变得尤为重要。Src酪氨酸激酶近年来在神经系统,尤其在神经元中的作用已经被阐明,其所介导的信号通路与AD致病相关的Aβ蛋白沉积和Tau蛋白缠绕息息相关。秀丽隐杆线虫是一类结构简单的有机体,近年来已被用作AD潜在基础病理过程的研究模型。本研究针对SFK家族成员Src酪氨酸蛋白激酶为靶点,设计化学合成药物2-(噻吩甲酰氨基)-N-(2-氯-6-甲基苯基)-1,3-硒唑-5-甲酰胺,命名为Y-11。采用Aβ1-42转基因线虫CL4176模型,研究Src抑制剂(Y-11)延缓线虫体内Aβ沉积的作用效果,并探讨其作用机制。主要内容如下:1、Y-11抑制线虫体内Aβ沉积的表型研究实验设计100μM,10μM和1μM三个Y-11化合物的药物剂量浓度,发现均具有抑制线虫体内Aβ毒性的作用,且作用效果呈浓度依赖性,以100μM浓度的Y-11化合物效果最好。我们以野生型线虫为材料做药物毒性检测,证明100μM浓度下Y-11化合物可以作为安全有效的剂量浓度。对线虫的产卵量及吞咽速率检测证明100μM浓度Y-11化合物对线虫的生存状态无明显影响。THT硫黄素染色法证明Y-11加药组明显抑制线虫脑部Aβ聚合物的沉积。H2DCF-DA荧光探针法证明Y-11化合物显著降低线虫体内ROS含量。抗H2O2实验证明Y-11化合物具有提升线虫抗氧化应激的能力。2、Y-11抑制线虫体内Aβ沉积的机制研究实时荧光定量PCR在mRNA水平检测给药Y-11后Aβ、daf-16、skn-1、hsf-1等相关基因的表达量情况,以actin-1作为内参基因,结果发现加药Y-11后Aβ基因mRNA的相对表达量没有明显差异,认为化合物Y-11降低Aβ毒性蛋白沉积是通过转录后水平调控。与此同时,经过Y-11处理后,hsf-1及其下游靶基因hsp12.6基因表达水平有明显升高,证实Y-11抑制Aβ毒性的产生可能涉及hsf-1所介导的信号通路。综上所述:Src抑制剂(Y-11化合物)可以显著降低CL4176线虫体内Aβ蛋白的异常沉积从而延缓CL4176秀丽隐杆线虫的瘫痪速率,实验验证Aβ毒性被抑制的原因可能是通过降低线虫体内ROS的含量,提高hsf-1信号通路相关基因mRNA的表达量实现的。