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TrzN是一种新的阿特拉津脱氯水解酶,它与AtzA具有相同的作用,但具有更广泛的底物谱。然而,TrzN在表达菌株中诱导表达时,容易形成不具有活力的包涵体。本实验旨在通过定向进化的方法,提高TrzN的可溶性表达及其酶活性。定向进化的两个关键性步骤是建立分子的多样性文库和高通量筛选体系。本实验采用Error-Prone PCR来建立分子的多样性,以pRBB作为载体建立突变体文库。根据TrzN水解阿特拉津产生羟基阿特拉津在平板上能产生水解圈的特性建立了高通量的筛选体系。突变菌株在37℃下过夜培养,