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【目的】通过本院自制中药复方逐痰通络汤对脑出血大鼠神经行为表现、不同时间点(1d、2d、3d、7d)大鼠血浆纤溶系统(t-PA、PAI-1、D-二聚体)活性及海马不同分区(CA1、CA2、CA3、DG)细胞凋亡水平的影响,探讨此方对脑出血急性期大鼠的作用及可能机制。
【方法】清洁级雄性SD大鼠96只,随机分为脑出血组、假手术组和逐痰通络汤治疗组(2g/ml),每组动物32只,各时间点大鼠8只;选用大黄、胆南星、地龙、全蝎、天麻、郁金、石菖蒲、天竹黄组成“逐痰通络汤”,中药水煎浓缩为1.15g/ml。采用胶原酶诱导法定位于脑尾状核建立大鼠脑出血模型,给药组于造模后1d、2d、3d、7d,4个时间点给予逐痰通络汤灌胃,(大鼠灌胃量每次1ml,每天2次);分别于出血后1d、2d、3d和7d分别进行前肢放置和角落转向试验:测定大鼠脑内血肿容积:双抗夹心ELISA法测定大鼠血浆t-PA、PAI-1和D-二聚体含量。免疫组化测定大鼠海马CA1、CA3和DG区Bcl-2蛋白表达。
【结果】
1.行为学:前肢放置试验、角落转向试验均显示ICH后在1stday大鼠即出现严重的神经功能障碍。ICH模型组在各个时间点的前肢放置百分率均显著性下降,与假手术组比较均有统计学差异(均P<0.001):在角落转向试验中,ICH模型组在各个时间点向右侧转向的百分率均大幅上升,与假手术组相比,差异有统计学意义(均P<0.001)。而给予相应时间点上的治疗后,两种行为均得到改善,与ICH模型组比较,差异有显著性意义(均P<0.001)。
2.脑血肿容积:与ICH模型组相比,逐痰通络汤治疗组第3d,7d显著降低脑血肿容积(P<0.05或P<0.001):
3.血浆纤溶系统活性:与假手术组相比,从第2d开始,模型组大鼠血浆t-PA和D-二聚体含量均显著性升高(P<0.01或P<0.001),同时血浆PAI-1含量降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001)。而给予药物治疗后,其相应的血浆t-PA含量从第2d开始显著性大幅升高,与ICH模型组相比差异具有显著性(P<0.05或P<0.001);血浆PAI-1含量也较ICH模型组下降,与ICH模型组第3d和第7d相比差异均具有显著性(P<0.05或P<0.01);相应的血浆D-二聚体含量升高幅度加大,与ICH模型组相比差异具有显著性(均P<0.001)。
4.海马不同脑区Bcl-2的表达:与假手术组相比,脑出血大鼠海马各分区于第3d和第7d均显著性较少了Bcl-2的表达(均P<0.001),而药物能够提高脑出血第3d海马CA1和DG区的Bcl-2表达(P<0.05或P<0.01),显著提高第7d脑出血大鼠CA1、CA3和DG区Bcl-2的表达(P<0.01或P<0.001)。
【结论】逐痰通络汤可以通过激活内源性纤溶系统的活性,减轻脑血肿,减轻淤血阻塞;同时逐痰通络汤还可以增加海马不同分区神经细胞的凋亡,达到对脑出血大鼠的保护作用。