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目的:通过建立脑缺血再灌注大鼠模型(MCAO),研究探讨头穴透刺对脑缺血大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移植后增殖、分化和迁移情况,及其对神经营养因子BDNF和细胞生长因子bFGF表达的影响,明确头穴透刺治疗缺血性卒中的作用机制,为头穴透刺治疗缺血性卒中提供新的理论依据。方法:实验采用改良线栓法制备MCAO,将160只实验大鼠随机分为假手术组、模型组、移植组、头穴透刺组,每组40只。假手术组结扎颈总动脉和颈外动脉,不插线;模型组仅制备模型;移植组于造模3天后侧脑室移植NSCs;头穴透刺组于NSCs移植24小时后对其采取干预措施,百会穴透刺太阳穴。分别于第3天、7天、14天、21天对各组大鼠进行观察。利用NSS评估神经功能缺失状况;利用TTC染色和HE染色了解脑梗塞后脑组织的病理学改变;通过免疫组化法检测Brdu阳性细胞、Nestin阳性细胞随不同的时间点的动态表达,描述NSCs增殖迁移轨迹;应用免疫组化技术,进行BDNF和bFGF免疫组化显色;Brdu/GFAP、BrdU/NSE荧光双标法观察细胞分化情况。结果:1.模型组、移植组和头穴透刺组大鼠神经功能缺失评分均随时间推移有所下降,头穴透刺组7天、14天、21天与模型组相同时间点比较评分下降,具有统计学意义(P<0.05)。2.头穴透刺组BrdU阳性细胞3天时开始增加,14天时到达高峰(P<0.05),头穴透刺组14天、21天较移植组14天、21天BrdU阳性细胞增加,具有统计学意义(P<0.05)。3.头穴透刺组Nestin免疫阳性细胞3天开始增加,7天时达到高峰,头穴透刺组14天、21天Nestin阳性细胞数量较移植组14天、21天明显增加,具有统计学意义(P<0.05)。4.头穴透刺组3天、7天、14天较移植组相应时间点Brdu/GFAP阳性细胞增多,具有统计学意义(P<0.05);头穴透刺组7天、14天较移植组7天、14天BrdU/NSE阳性细胞增多,具有统计学意义(P<0.05)。5.头穴透刺可以促进脑缺血后BDNF的表达,头穴透刺组14天、21天较移植组14天、21天BDNF阳性细胞表达增多,具有统计学意义(P<0.05),21天BDNF阳性细胞的表达达到高峰(P<0.05)。6.头穴透刺可以促进脑缺血后bFGF免疫阳性细胞增多,头穴透刺组7天、14天、21天较移植组相同时间点bFGF免疫阳性细胞表达增加,有统计学意义(P<0.05)。结论:1.头穴透刺能促进脑缺血大鼠NSCs移植后神经功能缺损的改善。2.头穴透刺能促进移植后的NSCs向神经元细胞和神经胶质细胞分化,并能促进移植后的NSCs增殖及神经营养因子BDNF、bFGF的表达。3.头穴透刺与单独神经干细胞移植比较,具有促进移植后的神经干细胞迁移,使其呈现多方向迁移路径的作用。4.头穴透刺通过促进移植后神经干细胞增殖分化及神经营养因子BDNF、bFGF的表达,从而增强了NSCs移植治疗脑缺血的作用。