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目的:非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是目前最常见的慢性肝脏疾病之一，大量研究已经证明高脂血症是NAFLD的危险因素，并且有研究证明铁与慢性代谢性疾病（NAFLD、肥胖、2型糖尿病等）存在相关性。目前关于游离脂肪酸(FFAs)和铁对NAFLD协同的作用尚未明确。本课题采用FFAs和铁诱导肝细胞建立NAFLD模型，探讨FFAs和铁在NAFLD发病过程中是否具有联合作用及作用机制。 方法:采用油酸(OA)和铁分别干预肝脏HepG2细胞，通过MTT实验测定细胞活力。0.5mmol/L OA与不同浓度的铁(0.125、0.25、0.5mmol/L)培养HepG2细胞后，进行油红O染色，测定细胞内甘油三酯(TG)的含量，并采用real timePCR法检测脂肪酸β-氧化的关键基因[乙酰CoA合成酶(ACSL-1)、肉毒碱棕榈酰基转移酶1a(CPT-1a)、脂肪酸合成酶(FAS)]的表达。然后采用western blot方法检测ACSL-1、CPT-1a、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、p-ACC、FAS蛋白表达水平。测定脂肪酸氧化损伤的相关指标，包括脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量和抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、过氧化氢酶(CAT)的活性。 结果:随着OA和铁浓度的增加，细胞内被油红O染色的红色脂滴数量逐渐增多，甘油三酯含量逐渐增加。在油酸浓度一定时，随着铁离子浓度的增加，ACSL-1和CPT-1a的mRNA表达水平逐渐降低(分别与对照组及0.5 mmol/L OA组相比，P＜0.05);FAS的mRNA表达没有明显的变化趋势。Western blot结果显示，在OA和铁诱导下，CPT-1a和ACSL-1蛋白表达水平显著低于对照组和OA组(P＜0.05)，磷酸化ACC水平显著降低(P＜0.05)，FAS蛋白表达变化不明显。抗氧化活性检测结果显示，油酸和铁共同作用时SOD、GPX、CAT的活性明显低于对照组和OA组，而MDA含量明显升高(P＜0.05)。 结论:FFAs和铁能够诱导NAFLD肝细胞模型，且铁可能通过影响脂肪酸的合成、β-氧化及氧化损伤参与并加重油酸所致的NAFLD的发病过程。