蓝莓花青苷合成及对生长调节剂的响应

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蓝莓因其花青苷含量高而备受关注,选育高花青苷含量的蓝莓一直是蓝莓育种热点。本论文在对我国大兴安岭地区野生蓝莓资源进行踏查、种质收集的基础上,以野生蓝莓和生产主栽品种‘蓝丰’为研究对象,研究了果实发育过程中关键品质的形成特性,分析了蓝莓花青苷的合成路径,并以‘蓝丰’为试材,分析了果实发育过程中花青苷等关键品质形成对植物生长调节剂的响应。主要研究结果如下1.筛选出花青苷含量高达5.31mg/g高花青素的蓝莓种质,尤以椭圆形果含量最高,可达7.31mg/g。2.明确了野生蓝莓和‘蓝丰’品种蓝莓果实发育过程中关键品质形成特性及其相互关系。(1)花青苷含量在转色期前含量很低,进入转色期后含量迅速增加。在整个发育过程中,野生蓝莓的花青苷含量均高于‘蓝丰’。转色期前总酚和类黄酮含量较高,随着果实发育,可溶性糖含量不断增加,总酚和类黄酮含量整体呈下降趋势,成熟期略有上升。(2)转色期至成熟(S4-S5期),花青苷含量与总酚的含量极显著正相关(蓝丰,r=0.930**;野生蓝莓,r=0.906**;P<0.01),野生蓝莓的花青苷与类黄酮(r=0.984**)也呈极显著正相关(P<0.01)。(3)野生蓝莓的花青苷鉴定出10种组分,其中锦葵色素-3-0-葡萄糖苷的含量最多。‘蓝丰’花青苷鉴定出6种组分,以锦葵色素-3-O-半乳糖苷。3.通过比较改良CTAB法、TRIzol法、试剂盒法、SDS法等4种方法,确定改良CTAB法最优,能有效去除果实中的多糖和酚类物质,获得了质量较好,纯度较高的总RNA。4.明确了蓝莓花青苷代谢关键基因的时间表达模式。采用RealtimePCR的方法分析MYB、CHS、F3’H、F3’5’H、DFR、ANS这6个基因在蓝莓不同发育阶段的表达模式,基因的表达高峰期都出现在蓝莓转色期(S4和S5期)。DFR和ANS为花青苷合成过程中较为关键的基因,野生蓝莓花青苷含量高可能与这两个基因在转色期高表达有关。5.探讨了植物生长调节剂对蓝莓果实生长发育及花青苷代谢的影响。对白果期的‘蓝丰’进行ABA(600mg/1)、GA3(30mg/l)、NAA(200mg/l)、清水(CK)处理后发现:ABA能促进果实软化,显著提高果实花青苷、果糖和葡萄糖的含量22.29%、49.85%和27.68%,蓝莓花青苷合成过程中MYB、CHS、DFR、ANS的转录水平明显提高;NAA和GA3处理都减少花青苷的积累,但效果不明显,花青苷含量都为2.29mg/g。NAA影著降低单果重,延缓果实变软,抑制总酚、类黄酮的积累,明显抑制ANS的表达;GA3显著提高果实单果重和可溶性固形物的含量10.73%和6.85%。
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