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超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpCβ-内酰胺酶是革兰阴性杆菌对第三、四代头孢菌素类药物最重要的耐药机制。产CTX-M型ESBLs的大肠杆菌因其能高效水解临床一线药物——三代头孢菌素类药物,且食品源和动物源产ESBLs大肠杆菌可经食物链直接或间接传播给人,给人和动物的健康造成严重威胁。本研究通过比较不同来源(动物、食品和人)产CTX-M型ESBLs大肠杆菌及其质粒的相关性,为正确评估三代头孢菌素类药物在食品动物使用的风险性提供科学依据。2010-2014年间从广州市各地区采集不同来源样品,包括肉类食品(猪肉和鸡肉)、医院病人和社区健康人源、屠宰前食品动物(猪和鸡),分离了931株头孢噻肟非敏感大肠杆菌。采用PCR和测序方法对931株大肠杆菌进行5种ESBLs和p AmpC基因的检测和分析。结果显示,92.8%(864/931)的菌株检测到blaCTX-M、bla SHV、bla DHA和/或bla CMY基因,其中blaCTX-M-14、bla CTX-M-55和blaCTX-M-65是主要的流行型,分别有251株、150株和124株。另外,有73株携带blaCMY基因。blaCTX-M在肉类食品源大肠杆菌中检出率最高为86.5%;blaCMY在食品动物源中检出率最高10.6%。blaCTX-M-1G、bla CMY、bla CTX-M-55和blaCTX-M-24a阳性检出率在食品动物源菌株中最高,其次为肉类食品源和人源。blaCTX-M和blaCTX-M-65在肉类食品源菌株中检出率最高,说明肉类食品被耐药菌严重污染。blaCTX-M-14和blaCTX-M-15在人源菌株中检出率最高,其次为食品动物源和肉类食品源。采用琼脂稀释法测试了931株不同来源大肠杆菌对20种抗菌药的敏感性,结果发现,对氨苄西林、头孢噻肟、链霉素、复方新诺明和四环素的耐药率均超过70%,受试的所有菌株对亚胺培南敏感。人、食品动物和肉类食品三种不同来源大肠杆菌均表现对多种抗菌药物耐药,但对不同药物的耐药率有显著差异。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和大肠杆菌系统进化分群方法研究100株bla CTX-M-55阳性菌株的克隆关系。结果表明大部分bla CTX-M-55阳性菌为非克隆传播关系,且多属于A组(45.0%),未检测出B2组大肠杆菌。采用接合实验、化学转化和质粒复制子分型方法研究bla CTX-M-55的水平传播和质粒特征。100株bla CTX-M-55阳性菌株成功获得了60株接合子和转化子,对质粒进行复制子分型,发现食品动物源blaCTX-M-55菌株以Inc FII型质粒为主,而人源和肉类食品源菌株以Inc FII型和Inc I1型质粒为主。综上所述,产ESBLs大肠杆菌在人源、食品动物源和肉类食品源中分布广泛,且bla CTX-M-55的流行主要以Inc FII型质粒水平传播为主,其可能通过食物链从动物传播到人。