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糖皮质激素的多种生理和药理效应可能与其非基因组效应有关,糖皮质激素受体(Glucocorticoid Receptor,GR)参与某些非基因组效应的信号转导,G蛋白信号转导调节因子(Regulator of G protein signaling 4,RGS4)与GR之间的相互作用可能是调节这一效应的重要途径之一。本研究拟采用酵母双杂交技术探讨RGS4与GR之间是否存在相互作用,进而明确相互作用的确切位点。 该研究工作分为两个部分:1、利用酵母双杂交技术研究RGS4与GR各结构域之间的相互作用;2、利用GST-pulldown技术研究RGS4及GR各结构域蛋白之间相互作用。 采用SD大鼠肝组织RNA,构建RGS4蛋白全编码框表达质粒作为诱饵蛋白表达质粒,并构建GR(AB、CD、EF、C、D)结构域的AD质粒,成功地建立了酵母双杂交体系。酵母双杂交结果显示,RGS4全编码框表达质粒转染酵母细胞后无自激活作用,GR各个