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蓝莓是一种具有较高经济价值和广阔开发前景的新兴小浆果树种,由于其果实具有很高的营养价值和特殊的保健功效,被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一,市场供不应求。近年来,我国蓝莓产业发展迅速,商业化栽培区不断南移,但以广东省为代表的南方新兴栽培区温度偏高、土壤养分匮乏,严重制约了蓝莓产业发展。目前,菌根技术越来越多在农林业中应用,内生真菌的生理生态功能显著,已被证明能提高植物的抗性和引种成功率,运用菌根技术来改善华南地区蓝莓栽培种植条件是很好的途径。因而,本论文的研究以蓝莓内生真菌为核心,进行内生真菌的分离、筛选,揭示内生真菌的多样性与生态特征,并进一步展开高效菌株筛选及其固体发酵条件优化,为更好的利用蓝莓内生真菌提供理论依据,本论文研究的主要结果如下:(1)对蓝莓内生真菌多样性与生态特征的揭示,应用高通量测序技术,在野生蓝莓根系内发现了多种真菌的OTUs,包括公认的杜鹃花类菌根(ERM)真菌、外生菌根(ECM)真菌和常见的深色有隔内生真菌(DSE)等。优势门是子囊菌门和担子菌门,主要的属是红菇属(Russula)、蜡壳耳属(Sebacina)等;通过分析,我们发现两种野生蓝莓根系相关真菌群落对不同海拔梯度会产生不同的响应;地理和环境因子也影响了蓝莓内生真菌的群落结构及多样性,其中环境因子中土壤pH是最重要的影响因子;此外,在野生蓝莓根系相关真菌优势类群(Tags>1000)中,大多数对海拔和宿主都有一定的偏好性。(2)我们运用纯培养分离出540株生长缓慢的菌株,用形态学方法结合分子鉴定得到了68株差异菌株,属21个真菌类群,包括常见的ERM真菌(Oidiodendron sp.)、DSE(Phialocephala fortinii)和许多柔膜菌目未鉴定种等;并发现了菌株14-16和1-28疑是新种。(3)通过分析表明,可培养的野生蓝莓根系内生真菌群落也受宿主、地理和环境因子的影响;且对比高通量测序的结果,发现在高海拔生境可培养的内生真菌类群要比低海拔生境少。(4)在开放的生态系统中蜡壳耳目(Sebacinales)、柔膜菌目(Helotiales)类群和DSE Phialocephala fortinii等是ERM真菌群落的优势类群,而被频繁分离到的Oidiodendron和Rhizoscyphus等典型ERM真菌只是纯培养条件下的优势种。(5)通过对蓝莓栽培品种的接种试验(选取了10株代表菌株),我们发现蓝莓内生真菌菌株3-41(Cryptosporiopsis ericae strain 3-41)和14-16(Oidiodendron sp.strain14-16)对蓝莓地上部生物量都有显著的促进作用,其中菌株3-41还显著的促进了蓝莓植株总生物量的增加。(6)高效菌株的固体发酵条件优化试验结果表明,菌株3-41的最适固体发酵条件为,麦麸79%、玉米粉15%、黄豆粉6%、KH2PO4(0.03%)、Mg SO4·7H2O(0.02%)、初始含水量80%、温度24℃和pH=7;菌株14-32(Rhizoscyphus aff.ericae strain 14-32),麦麸87%、玉米粉10%、黄豆粉3%、KH2PO4(0.03%)、Mg SO4·7H2O(0.02%)、初始含水量80%、温度24℃和pH=6;菌株14-16,麦麸76%、玉米粉15%、黄豆粉9%、KH2PO4(0.03%)、Mg SO4·7H2O(0.02%)、初始含水量40%、温度28℃和pH=6。