酚氧化酶原（proPO）是对虾类体液免疫的特异性因子之一，在对虾免疫过程中具有十分重要的作用，建立proPO的体外表达系统对于深入研究对虾proPO参与免疫的过程及作用具重要意义。本研究将斑节对虾proPO基因克隆进原核表达载体pET-28a（+），在大肠杆菌中表达，SDS-PAGE和Western blot显示在78.5 kDa附近有一条特异性条带。采用低温诱导表达后可直接检测到酚氧化酶（PO）的活性，对表达后形成的包涵体进行变复性处理后也可检测到PO的活性。将proPO基因克隆进昆虫细胞表达载体pIZT／V5-His，转染草地贪夜蛾（Sf 9）细胞，在荧光显微镜下可观察到绿色荧光。经过Zeocin^TM抗生素筛选后，转基因细胞阳性率约在70％以上。用PCR可在细胞中检测到相应的GFP和proPO序列；SDS-PAGE检测可在Sf9细胞中可以检测到一条分子量约为67 kDa的特异性条带，并且具有PO的酶活性，显示proPO在Sf9细胞中得到成功表达。为了建立pIZT／V5-His的Bm-N细胞表达系统，将pIZT／V5-His-proPO转染Bm-N纽胞，结果同样也检测到发绿色荧光的细胞，根据PCR检测和表达后PO活性测定结果，认为已成功建立了一个新的pIZT／V5-His的Bm-N细胞表达系统。