论文部分内容阅读
叶酸是人体正常发育的重要微营养物质,其涉及dUMP到dTMP的合成,同时通过同型半胱氨酸（HC）合成蛋氨酸（Met）、S-腺苷蛋氨酸（SAM）的生化过程而影响DNA甲基化。因此,叶酸、维生素B12(B12)缺乏以及Met/SAM合成受阻,可引起dUMP积累并掺入DNA,从而导致各种DNA结构损伤;同时可影响细胞尤其DNA甲基化过程,从而影响基因表达、染色体分离。 本研究以胞质阻断微核分析（CBMN）研究了叶酸对维护乳腺癌患者及其对照个体淋巴细胞基因组稳定性的作用及差异,并探讨了叶酸代谢途径中的重要分子Met、B12缺乏对BRCAI突变的乳腺癌患者成淋巴细胞株及正常人成淋巴细胞株遗传毒性效应。 研究首先从24例乳腺癌患者、30例正常人外周血中分离淋巴细胞,在含30nM、120nM、240nM 叶酸的RPMI-1640 培养基中（8%透析小牛血清、100U双抗、2mM谷氨酰胺、pH7.0）培养,第8天以细胞松弛素B（CB）阻断细胞质分裂,28小时后收获细胞,以CMBN分析叶酸缺乏对人类淋巴细胞产生的遗传毒性效应:为了证实Met、B12对叶酸代谢和遗传稳定性的影响,试验还以15,50μM 的Met与75～1200 pM B12组合的12种RPMI-1640 培养基（8%透析小牛血清、100U 双抗、2mM 谷氨酰胺、pH7.0）,培养携带BRCAI,基因突变的乳腺癌患者成淋巴细胞株GM13705和正常人成淋巴细胞株GM12593,第8天以细胞松弛素B（CB）阻断细胞质分裂,28小时后收获细胞,以CMBN分析Met、B12对人类成淋巴细胞株基因组稳定性的影响。 试验结果表明:1、在本试验浓度范围内,叶酸浓度与乳腺癌患者及其对照个体淋巴细胞遗传损伤之间存在显著的负相关（r=-0.248-0.832,p<0.0001）:叶酸在30nM时,遗传损伤均显著高于120nM及240nM （p<0.001～0.05）:而120nM及240nM两测试组之间未观察到各指标间的统计学差异,当叶酸升至120nM时,遗传损伤降到最低,提示在本试验条件下,120nM的叶酸是防范人类淋巴细胞遗传损伤的最