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卡波济肉瘤(Kaposi’s sarcoma,KS)是获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)患者晚期发生率最高的恶性肿瘤。既往研究证实,其病原卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)不能独立引发KS,还需要协同因子的参与。然而促使KSHV引发KS的因素目前还未完全清楚。已经证明,人类单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus 1,HSV-1)、人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)、人类疱疹病毒6型(human herpesvirus 6,HHV-6)和人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)反式激活蛋白(transactivative transcription protein,Tat)是激活KSHV裂解性周期复制的重要协同因子。鉴于HIV-1血清阳性人群中人类单纯疱疹病毒2型(human herpes simplex virus-2,HSV-2)阳性率远高于HIV-1阴性人群,HSV-2与HIV-1之间密切相关,本研究我们进一步探讨了HSV-2影响KSHV复制的潜能以及HIV-1 Tat对该过程的影响。实验首先将HSV-2标准株333感染原发性渗出性淋巴瘤【primary effusion lymphoma,PEL,又称体腔渗出性淋巴瘤(bodycavity-based lymphoma,BCBL)】来源的BCBL-1细胞,Western blot结果显示,HSV-2感染BCBL-1细胞72 h后HSV-2型特异性糖蛋白G-2(glycoprotein G-2,gG-2)开始稳定表达。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-timePCR)检测结果表明,HSV-2感染可以诱导KSHV ORF50(KSHV周期复制的开关基因)、ORF26(编码KSHV次要衣壳蛋白)和ORF29(编码KSHV包装相关蛋白)mRNA转录水平升高。与对照组比较,HSV-2感染组3、6、12、24、48、72和96 h ORF50 mRNA水平分别升高了9.92、2.55、227、31.6、6.6、75和3.02倍(P＜0.05)。类似地,ORF26 mRNA表达水平在3～96 h也呈现不同程度的升高,而ORF29 mRNA表达水平的升高集中在48～96 h。免疫荧光测定(immunofluorescence assay,IFA)结果显示,HSV-2感染BCBL-1同时还可诱导KSHV裂解周期蛋白的表达。虫荧光素酶报告实验验证了HSV-2对ORF50启动子的直接激活作用。进一步将HIV-1 Tat质粒转染HSV-2感染的BCBL-1细胞,采用Real-time PCR和Western blot分别检测KSHV ORF26 mRNA转录和病毒白细胞介素6(Viral Interleukin-6,vIL-6)的表达。与单纯HSV-2感染比较,KSHV ORF26 mRNA转录水平在6、24、48和72 h分别升高了3.92、1.67、2.74和1.82倍(P＜0.05),vIL-6表达水平在6～72 h同样有不同程度的升高。虫荧光素酶报告实验显示,Tat可以增强HSV-2激活KSHV ORF 50启动子活性。以上结果提示,HSV-2可能通过诱导KSHV复制来提高病毒载量从而参与KS的致病过程;HIV-1 Tat能够增强HSV-2对KSHV的激活作用。