UCN-01去除细胞G<,2>期阻滞提高放射敏感性的研究

来源 :中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dl_wan
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目的:观察已知p53基因突变的肿瘤细胞在X线照射后细胞G<,2>期阻滞情况,以及药物7-hydroxystaurosporine(UCN-01)能否去除此G<,2>期阻滞并增加肿瘤细胞的放射敏感性,并在此基础上进一步探讨UCN-01去除细胞G<,2>期阻滞及增加放射敏感性的机制.材料与方法:选用已知p53突变的人鼻咽癌CNE-1细胞系和人肺腺癌973细胞系.采用细胞培养和流式细胞仪技术分析X线照射对以上两种细胞的细胞周期的影响,观察UCN-01对放射导致的细胞G<,2>期阻滞的影响.应用细胞克隆形成实验观察UCN-01去除G<,2>期阻滞对这两种细胞放射敏感性的影响.应用蛋白印迹法(Western blot)测定在UCN-01去除CNE-1细胞G<,2>期阻滞的过程中,细胞内磷酸化CDC2-Tyr15含量的变化;CNE-1细胞经Annexin V和PI染色后,采用流式细胞仪技术测定UCN-01对照射后细胞凋亡比例的影响;采用Comet分析法检测UCN-01对细胞修复放射性DNA损伤能力的影响.
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