本论文主要对脂肪酶的固定化、有机相中固定化脂肪酶催化特性、固定化脂肪酶催化合成棕榈酸异辛酯的应用进行了研究。其主要内容如下:一.脂肪酶的固定化:本文以D311离子交换树脂为载体,通过离子交换吸附法对Lipolase 100L脂肪酶进行了固定化。采用考马斯亮蓝法测定了酶蛋白在离子交换树脂上的吸附率,考察并得到了酶固定化的最佳条件:在pH10缓冲液下,加酶液量为每克预处理过的树脂加入1.5mL,吸附时间为10h,吸附温度为35℃。脂肪酶在非水相系统中具有水相反应所不具备的很多优点,将所得固定化酶用于催化合成月桂酸月桂酯,考察了非水相中固定化脂肪酶催化酯化反应的特性,从反应温度、酶用量、最佳水含量、溶剂、底物酸醇摩尔比等方面对反应进行了全面的研究。在月桂酸月桂酯合成反应中,酸醇摩尔比为0.2:0.2(mol/L),最佳固定化酶初水含量为8%,在最佳反应介质异辛烷中固定化酶用量为200mg,反应时间为210min,55℃的最佳反应温度条件下,酯合成反应的转化率可达91.3%,得到的固定化脂肪酶的催化反应活化能Ea为19.00kJ/mol。反应的最佳酸醇摩尔比为1:2。将固定化酶在4℃下放置2个月,酶活损失很小,贮存稳定性较好。二.固定化脂肪酶连续化催化性能研究:根据自制固定化脂肪酶及载体的特征,采用简易的PBR生物反应装置,实现了固定化脂肪酶对月桂酸月桂酯的连续化反应。考察了底物进料速度、催化剂装载量对催化反应的影响。当月桂酸、月桂醇底物浓度均为0.4mol/L时,得到的最佳流加速度为10mL/h,最适装载量为6g。将固定化脂肪酶用于催化月桂酸月桂酯反应的全过程,每次以反应平衡后再反应1h计,重复60次,酶活力还保留达89.82%。三.固定化脂肪酶催化合成棕榈酸异辛酯的应用:实验结果表明自制的固定化脂肪酶Lipolase在最佳的棕榈酸和异辛醇的摩尔比为1:1.5,反应温度为40℃的条件下,棕榈酸异辛酯的合成反应能很好的实现。通过气相色谱分析,采用相对面积法,得到酯合成的转化率为97.91%.