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目的:动脉粥样硬化(AS)严重危害人类健康,内皮损伤是其始动因素,内皮细胞间质转化(EndMT)参与AS的早期病理过程,但确切机制仍不清楚。Adropin是新发现的一种分泌型膜结合蛋白,具有内皮细胞保护作用。本研究旨在探讨Adropin是否通过抑制EndMT减轻AS及其分子机制。方法:动物实验:使用8周龄C57BL/6J背景的ApoE-/-(载脂蛋白E敲除)小鼠,经13周高脂饲养建立AS模型,分为三组(n=11-14):(1)正常饲养组(ND),给予正常饮食;(2)高脂饲养组(HFD),给予高脂饮食;(3)高脂饲养+Adropin组(HFD+Adropin),给予高脂饮食和连续13周腹腔注射Adropin105μg/kg·d。取主动脉根部用于:油红O染色法检测AS斑块内脂质面积;HE染色测定斑块面积;整根主动脉用于:实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测内皮细胞标记蛋白——白细胞分化抗原(CD)31、血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin),间质细胞标记蛋白——α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌22α(SM22α)、成纤维细胞特异性蛋白(FSP)-1,以及Adropin等mRNA的相对表达;免疫荧光法检测CD31、SM22α的定位表达。细胞实验:使用人脐静脉内皮细胞(HUVEC),使用100mol/L过氧化氢(H2O2)体外培养诱导建立EndMT模型,分为四组:Control组,正常培养;H2O2组,H2O2干预;Adropin组,在H2O2干预前10分钟加30ng/ml的Adropin孵育;Adropin+TGF-β质粒组,Adropin干预前转染TGF-β质粒。计算细胞培养的第0、2、4、6天间质转化的梭形细胞比率。实验结束时(第6天),取细胞Western-Blot法测定转化生长因子(TGF)-β1、TGF-β2、CD31、VE-cadherin、α-SMA、SM22α的蛋白表达量及信号蛋白Smad2/3的磷酸化水平;免疫荧光法测定α-SMA的表达;RT-PCR法测定TGF-β1、TGF-β2、TGF-β受体(TGF-βR)、CD31、VE-cadherin、α-SMA、SM22α、FSP-1 mRNA的相对表达;荧光法测定细胞活性氧(ROS)水平。全自动生化分析检测血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG),ELISA法检测血清氧化低密度脂蛋白(oxLDL)浓度。结果:动物实验:与ND组比较,高脂饲养(HFD组)诱导ApoE-/-小鼠出现明显AS,表现为主动脉根部AS斑块脂质面积(油红O染色)、斑块面积(HE染色)增加[油红O染色,(0.06±0.02)%vs.(0.27±0.16)%,P<0.05;HE染色,(0.12±0.04)%vs.(0.30±0.08)%,P<0.05],Adropin(HFD+Adropin组)能够减轻高脂饲养引起的AS[油红O、HE染色,分别(0.04±0.03)%和(0.10±0.08)%,均p<0.05]。与ND组比较,HFD组出现血管内皮明显间质转化,表现为主动脉CD31、VE-cadherin的m RNA下降[CD31,(1.71±0.68)vs.(0.23±0.34),P<0.05;VE-cadherin,(11.24±5.44)vs.(0.36±0.51),p<0.05],α-SMA、FSP-1的m RNA升高[α-SMA,(0.03±0.01)vs.(2.34±0.99),P<0.05,FSP-1,(0.27±0.17)vs(1.92±0.60),P<0.05];与HFD组相比,Adropin干预减轻了血管内皮间质转化[HFD+Adropin组:CD31,(1.54±0.18),P<0.05;α-SMA,(0.15±0.24),P<0.05;FSP-1,(0.29±0.30),P<0.05]。与ND组比较,HFD组的Adropin m RNA表达升高,外源性Adropin干预降低自身Adropin m RNA的表达。与ND组比较,HFD组血清TC、LDL-C、ox-LDL、HDL-C水平升高,对TG无影响,体重增加,Adropin干预未能降低上述血脂和体重水平。细胞实验:与Control比较,H2O2促进内皮细胞形态呈明显间质转化改变(以第6天最为明显),表现为梭形细胞和α-SMA阳性细胞增加,同时内皮细胞标志CD31、VE-cadherin的m RNA和蛋白表达下降,间质细胞标志α-SMA、SM22α及信号通路相关因子TGF-β1、TGF-β2的m RNA和蛋白表达增加,TGF-β的下游信号蛋白p(磷酸化)-Smad2/3表达也增加,Adropin干预则逆转上述变化[H2O2+Adropin vs H2O2,梭形细胞,(0.19±0.05)vs(0.57±0.07)%,p<0.05;α-SMA阳性细胞,(0.10±0.04)vs(0.93±0.01)%,p<0.05][p-Smad2/3,Control,(0.36±0.25);H2O2,(0.74±0.31);Adropin(0.34±0.21),Adropin vs H2O2,p<0.05]。转染TGF-β(Adropin+TGF-β组)则抑制了上述Adropin减轻内皮细胞间质转化及抑制TGF-β/Smad2/3信号通路的作用。结论:Adropin能够通过非调脂途径减轻小鼠动脉粥样硬化程度,其机制可能与抑制内皮细胞间质转化有关,TGF-β/Smad2/3信号通路可能参与上述过程。