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左心室肥厚是原发性高血压引起靶器官损害的一种心脏病，并被证实为加重冠心病、心力衰竭、脑卒中等心血管疾病的独立危险因素。因此，抑制左室肥厚已成为高血压治疗的重要目标。心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts, CFs)增殖和胶原合成增加，胶原过度增生、沉积并导致心肌重塑是高血压左室肥厚的重要病理基础。他汀类药物(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor, HMG-CoA还原酶抑制剂)除了调脂、减少心肌梗死和脑卒中等心血管事件发生以外，尚具有阻滞细胞周期进展、抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖、防止血栓形成及保护内皮等功能，其影响已远超过调脂所带来的效应。但是，其对高血压左心室重塑的影响目前尚不清楚。本研究以自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rat, SHR)和正常血压Wistar大鼠的CFs为实验对象，以胰酶和胶原酶混合消化差速贴壁法培养的SHR和正常血压Wistar大鼠CFs为实验模型，采用(1)改良的四氮唑盐(MTT)比色法测定细胞数目，流式细胞仪(FCM)分析技术检测细胞周期，ELISA法测定CFs Ⅰ型胶原合成功能，硝酸还原酶法测定NO含量，分光光度法测定NOS活性；(2)酶谱分析法(Zymography)测定明胶酶活性，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定MMP-1、MMP-2、TIMP-1和TIMP-2 mRNA表达量；(3)蛋白免疫印迹(Western blot)技术测定CFs MMP-1、TIMP-1和PTEN蛋白水平；(4)免疫荧光-共聚焦显微镜技术测定CFs的NF-κB的活化状态。观察HMG-CoA还原酶抑制剂阿伐他汀(atorvastatin)对SHR的CFs增殖、胶原合成的影响，研究阿伐他汀对SHR CFs的NOS-NO系统活性的作用，第四门阵医大攀俘d匕学位论文探讨阿伐他汀与SHR CFs的PTEN蛋白、MMPs/TINIPs及其NF一‘B表达的关系，.旨在阐明HMG一CoA还原酶抑制剂在逆转左室肥厚方面的作用，也为阿伐他汀药物防治高血压左室肥厚提供理论依据和新思路。 研究结果表明:(l)在基础状态下培养72h，SHR组CF:的M竹OD值为0.33土0.01，明显高于Wistar大鼠组(0.3肚0.01)，并有统计学差异 (P<0 .05)。在10-7 mol/L~IO4mol/L阿伐他汀作用下，SHR组分别为0.3肚0.01、0.26士0.01、0.24士0.01和0.22士0.01;Wis枉甘大鼠组CFs的OD值分别为0.28士0.01、0.26士0.01、0.23士0.01和0.21士0.01。随着阿伐他汀干预浓度的增加，两组大鼠CFs的OD值均呈递减趋势，与各自空白对照组比较均显著减低(P均<0.01)。阿伐他汀培养组与各自对照组比较，SHR组CFs增殖的抑制率分别为9.09%，21 .21%，27.27%，33.33%:Wis枉理组分别为6.67%，13.33%，23.33%，30，00%，其中在10一6 mol几和lo4mo比阿伐他汀作用下两组大鼠间比较差异显著(尸均<o，05)。(2)10’6mol/L阿伐他汀作用1 Zh、24h、48h、72h后，SHR的CFs的MTT比色A值分别为:0.3肚0.01、0.33士0.01、0.27士0.03、0.2肚0.02;与12h组t匕较，48h和72h组A值均明显降低(P<0.01);48h和72h组A值均明显低于24h组(P<0.01)。Wistar大鼠CFs的MTT比色A值分别为:0.28士0.02、0.25士0.03、0.2肚0.01、0.18士0.02;与12h组比较，48h和72h组A值均明显降低(P<0.01);48h组和72h组均明显低于24h组 (P<0.01，P<0.05)。(3)10’6mol/L阿伐他汀作用48h，SHR和Wistar大鼠CFs的G夕G:期细胞百分率均较各自对照组显著升高(尸均<0.01)，S期细胞百分率、仇舰期细胞百分率和增殖指数(proliferation index，PI)则较各自对照组显著降低(P均<0.01)。(4)在基础状态下，SHR组CFs的I型胶原含量(0.9狂0.02)较Wistar大鼠组(0.51士0.01)显著升高伊<0.01)。在10”mo比一10碑mo比的阿伐他汀作用下，SHR组CFsl型胶原含量分别为 0.8肚0.01、0.74士0.01、0.68士0.01和0.6肚0.02;Wistar大鼠组CFsl型胶原含量分别为0.73士0.01、0.65土0.01、0.6肚0.02和0.56士0.02。随着阿伐他汀干预浓度的增加，两组大鼠CFs的I型胶原含量均呈递增趋势，较各自对照组明显降低(均P<0.05)。10一7 mo比一1 04 mo讥的阿伐他汀培养组与各自对照组比较，SHR组培养上清液I型胶原合成减少率分别为17.53%、23.71%、29.90%、36.08%;第四军医大学博士学位论文wistar大鼠组分别为9.550，0、19.750，0、25.930，0、30.86%，其中在10一mol几~10碑mo比阿伐他汀作用下两组大鼠间比较具有统计学意义(均P<0.05)。(5)在10一7mol几、10一6 mo比、1 0.5 mol几和1 04 mouL阿伐他汀作用45小时，s皿和Wis枉甘大鼠CFs的PTEN蛋白水平均明显高于各自对照组(尸<0.01)，并呈一定的浓度依赖性。SHR组分别为:1 .63士0.12、1.9肚0.24、2.75士0.19和3.08士0.27，与对照组(1 .47士0.16)相比PTEN蛋白水平均明显升高(P均<0 .01);Wis七『大鼠组分别为:1.80士0.14、2.34士0.21、3.18士0.28和4.05土0.31，与对照组(l .6肚0.17)相比PTEN蛋白水平均明显升高(尸均<0.01);随着阿伐他汀浓度的增高，两组PTEN蛋白水平均递增趋势。(6)在基础状态下作用48h，SHR组CFs的NO含量(39.78士4.48 p mol/L)较Wistar大鼠组(47.47士4.46 p mo比)显著降低，并有统计学意义(P<0.0一)。10一smo比阿伐他汀作用不同时间，阿伐他汀能促进CFs分泌NO。SHR组24h、48h和72h