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尿道下裂是常见的泌尿生殖系统先天性复杂畸形,相比其他先天性畸形,尿道下裂发病率高达约3/1000-9/1000[1-4]。尿道下裂是一种非单因素致病的先天性畸形,其确切的发病机制仍不清楚,但是目前的观点认为尿道下裂发生可能与易感基因的表达相关[5]。近年来,尿道下裂遗传易感因素研究已经成为热点之一。本研究第一部分通过对不同部位以及不同严重程度尿道下裂包皮组织中AR、FGFR2和DGKK进行检测,探究AR、FGFR2和DGKK与不同严重程度尿道下裂发生的关系。第二部分我们拟对不同严重程度的尿道下裂包皮组织中DGKK蛋白行免疫组织化学染色,探究DGKK蛋白表达与尿道下裂的关系,为进一步研究DGKK基因功能和深入揭示DGKK参与尿道下裂发生的分子机制奠定基础。第一部分:不同部位包皮组织中及不同严重程度尿道下裂AR、FGFR2和DGKK的表达及意义【目的】通过对不同部位包皮组织中及不同严重程度尿道下裂AR、FGFR2和DGKK基因转录水平表达研究,探讨在不同严重程度尿道下裂形成过程中AR、FGFR2和DGKK的作用。【方法】根据阴茎下弯矫正后尿道开口的位置,将尿道下裂分为轻度、中度、重度三种类型,每型各15例患儿,取其背侧包皮及腹侧包皮,尿道下裂患儿年龄为0.75岁～5.75岁。20例包茎患儿背侧包皮和腹侧包皮作为对照,年龄3.75岁～12岁。应用实时荧光定量聚合酶链反应技术（RT-PCR）法检测相应组织中的AR、FGFR2和DGKK基因的转录水平。【结果】（1）对尿道下裂患儿背侧包皮和腹侧包皮进行比较,结果显示AR、FGFR2、DGKK m RNA在背侧和腹侧表达无明显差异（P>0.05）。（2）不同严重程度尿道下裂组间AR m RNA（对照组1.1±0.51、轻度组1.04±0.98、中度组0.74±0.37、重度组1.23±0.75）和FGFR2 m RNA（对照组1.13±0.6、轻度组1.49±0.66、中度组1.42±0.74、重度组1.25±0.5）表达水平相比均无明显差异（P>0.05）。（3）尿道下裂组包皮组织中DGKK的表达较对照组明显升高,而且轻度（89.85±20.47）和中度（49.11±14.82）组包皮组织中DGKK m RNA表达水平较对照组（2.34±0.78）和重度尿道下裂组（2.79±1.07）明显升高（P<0.05）。【结论】背侧和腹侧包皮基因表达无明显差异。DGKK在轻中度尿道下裂中表达明显升高。DGKK可能是轻中度尿道下裂的易感基因。第二部分:DGKK蛋白在尿道下裂包皮组织中的表达及意义【目的】检测DGKK蛋白在不同严重程度尿道下裂和正常对照组包皮组织中的表达情况,探究DGKK蛋白表达和尿道下裂的关系。【方法】取轻度、中度、重度和对照组包皮各10例,采用免疫组织化学染色的方法检测组织中的DGKK蛋白表达情况。【结果】（1）DGKK蛋白主要表达于上皮细胞层的基底细胞核和棘细胞的细胞膜表面。（2）DGKK蛋白在不同严重程度尿道下裂表达阳性率分别为:正常对照组8/10;重度尿道下裂8/10;中度尿道下裂4/10;轻度尿道下裂3/10。（3）DGKK蛋白表达在轻度（0.18±0.96）和中度尿道下裂（0.38±0.30）包皮组织中,较对照组（0.738±0.13）和重度尿道下裂组（0.92±0.20）明显降低（P<0.05）,重度尿道下裂组DGKK蛋白表达与对照组无明显差异（P>0.05）,轻度和中度组尿道下裂之间DGKK蛋白表达无明显差异（P>0.05）。【结论】DGKK蛋白在轻度和中度尿道下裂中表达降低,提示DGKK可能是轻度及中度尿道下裂的主要风险基因。