芸薹属(Brassica)是十字花科(Cruciferae)植物中最重要的一属,包含了许多具有重要经济价值而得到广泛种植的作物。随着2004年多国芸薹属基因组计划(MBGP)的启动,芸薹属植物的分子细胞遗传学成为了新的热点。甘蓝(Brassica oleracea)作为芸薹属的三个基本种之一,属二倍体(2n=2x=CC=18)物种,是我国乃至世界的重要蔬菜之一。作为多国芸薹属基因组计划的主要研究对象,构建关于甘蓝的高密度的物理图谱,以及物理图谱与遗传图谱的整合细胞遗传图谱,直观地展现基因、分子标记等在染色体上的位置,成为甘蓝分子细胞遗传学研究的主要内容。开展遗传与物理图谱的整合或基因在染色体定位的研究的一个前提是能够准确、快速地辨认和区别不同的染色体。由于甘蓝染色体很小并且在细胞分裂期的收缩程度较其它很多植物的染色体更高和更均一,传统的显带技术无法对甘蓝染色体进行鉴定与区分,至今为止,未见有将荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ Hybridization,FISH)系统地用于区分小而均一的甘蓝染色体的报道。本论文利用FISH技术对甘蓝根尖的中期染色体进行鉴定和分型研究,主要研究结果如下:1.以甘蓝(K172-1)根尖为材料,通过对制片技术中相关因子的系统比较研究,建立了高效的甘蓝中期染色体制片技术体系。(1)根尖长度以0.5-0.6cm时取材细胞中期分裂相最多。(2)预处理以20℃下0.002mol/L的8-羟基喹啉溶液处理2h最为适宜。(3)37℃下2.5%(w/v)纤维素酶和2.5%(w/v)果胶酶混合液处理2h,背景没有细胞壁和细胞质的干扰,酶解效果最佳。2.甘蓝中期染色体核型分析表明,甘蓝体细胞染色体数2n=18,核型公式为K(2n)=18=16m+2Sm(SAT),第1对染色体为近中部着丝粒染色体(Sm),第2、3、4、5、6、7、8和9对染色体为中部着丝粒染色体(m),第1对染色体为随体染色体;染色体相对长度变异范围为8.304-14.198%,最长和最短染色体的相对长度之比为1.710:1;染色体属2A型,属对称性核型。3.甘蓝中期染色体FISH分型。利用双酶切后的甘蓝基因组DNA为探针,黑芥基因组DNA(B基因组)作为封阻剂,可以准确鉴定甘蓝第1、4、7和9对染色体,实现了对甘蓝中期染色体精确鉴定的初步研究。4.核型与FISH分型的比较研究表明,核型只能鉴定具备明显形态学特征的甘蓝中期染色体,而FISH分型比核型能鉴定更多数目的甘蓝中期染色体。上述研究结果对今后甘蓝中期染色体上的精确基因定位,构建高密度的物理图谱,开展芸薹属与拟南芥的比较基因组研究,以及进一步探讨甘蓝的起源和进化等分子细胞遗传学的研究都具有重要意义。