钝顶螺旋藻多糖抗病毒及抗肿瘤作用的研究

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本文报道了钝顶螺旋藻多糖(PSP)抗病毒作用的研究以及抗肿瘤作用的研究。以改良的三氯乙酸法进行提取,所得产品多糖质量含量达92%以上,优于传统的Sevag法。抗病毒作用的研究选用单纯疱疹病毒1型(HSV-1)标准株(SM44),体外实验在Vero细胞中进行,在证实PSP抗HSV-1活性优于目前临床治疗该病毒感染的首选药物阿昔洛韦的基础上,进一步探讨了PSP抗HSV-1作用的机制。以不同剂量的PSP作用于病毒复制周期的各个阶段,以病毒半数感染量(TCID50),细胞病变(CPE),蚀斑形成单位(PFU),MTT法及核酸分子杂交作为评价指标,结果表明,PSP抗HSV-1作用的机制与阻滞病毒向细胞吸附,抑制感染细胞病毒的复制和抑制HSV-1糖蛋白gG基因的转录有关。体内实验以PSP治疗小鼠HSV-1感染,结果PSP治疗组小鼠的存活率明显高于对照组。同时进行了PSP抗肿瘤作用的研究,体外实验以MTT法测定PSP对肿瘤细胞增殖的抑制作用,光镜观察及流式细胞术检测PSP诱导的HeLa细胞凋亡,首次发现PSP可明显抑制HeLa细胞的增殖,使HeLa细胞发生G1期阻滞并诱导HeLa细胞凋亡;PSP不仅可抑制HepG-2细胞的增殖,而且可抑制HepG-2细胞中IGF-2 mRNA的表达;PSP对体外培养的胃肠道癌细胞亦有明显的抑制作用。体内实验观察PSP对小鼠S-180肉瘤的抑制作用,PSP在50~200 mg/kg的剂量范围对小鼠S-180肉瘤,均有一定的抑制作用。本研究还采用真核基因表达技术,构建了HSV-1绿色荧光蛋白报告基因表达体系,结果不仅提示PSP抗HSV-1的机制可能与抑制HSV-1启动子ICP6活性有关,同时将为抗病毒药物的筛选提供一种简便、直观、快速、敏感的方法。
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