双亲性短肽仿酶固定化及反应过程强化

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本论文以包含咪唑基的双亲短肽Fmoc-FFH为构筑单元,利用Fmoc-FF自组装和共组装性能,制备得到两种超分子人工水解酶。通过扫描电子显微镜和透射电子显微镜的方法对人工水解酶的微观形貌进行了表征分析,同时利用对硝基苯酚乙酸酯作为水解底物,考察了人工水解酶的催化活性、动力学行为、重复利用性和储存稳定性等性质。进一步,通过对人工水解酶的制备工艺和反应过程中的工艺条件进行优化,提高了仿酶的催化活性。本论文主要结论如下:(1)超分子共组装人工水解酶:结合两亲性短肽Fmoc-FFH自组装特性和与PEI的静电作用,设计合成了一种新型的人工水解酶,即Fmoc-FFH/PEI催化囊(FPCs)。通过戊二醛交联作用,显著提高了催化囊(FPGCs)的稳定性。结果显示,与Fmoc-FFH水凝胶相比较,催化囊具有很高的反应活性,其水解酶活可以达到54.79 U g-1;其原因主要是催化囊内表面具有高浓度的催化中心。并且两种催化囊均表现出天然酶的动力学特性。此外,交联后的催化囊具有非常好的重复利用性和储存稳定性。(2)超分子两亲短肽Fmoc-FFH自组装纳米纤维膜催化反应器:以Fmoc-FFH单体为基本单元设计合成了一种简单的催化膜反应器,由于Fmoc-FFH纳米纤维膜具有高密度的催化中心组氨酸,使得这种人工生物膜在PNPA水解过程中表现出非常好的催化活性;此外,该催化膜反应器具有与天然酶相似的酶学性质,连续重复利用8次后其酶活仍能达到首次使用的80%左右,呈现出非常好的重复利用性。
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