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杂交兰无菌播种和再生体系是杂交育种得以实现的重要环节，对其研究十分必要。本实验以兰属内杂交蒴果为材料，系统研究蒴果采收时期，种子预处理，基本培养基，植物生长调节剂，有机添加物等对杂交种子萌发的影响；以春兰与大花蕙兰两个品种‘梦境’和‘皇后’杂交所得后代的原球茎为材料，对其增殖分化及壮苗生根的影响因素进行系统研究，结果如下：1.杂交蒴果采收期以授粉6-8个月为宜，2%的NaOH溶液和0.5-5%的NaClO溶液预处理有利于杂交种子的萌发；杂交种子萌发KC为基本培养基，培养方式为静置培养的效果最好；KT对于种子的萌发总体效果不如6-BA，6-BA1.0-2.0mg/L对于种子萌发较好；活性炭对种子萌发的影响最大，其次是NAA和6-BA，椰汁对杂交种子萌发的影响最小，添加椰汁的效果反而不如不添加的效果，最佳组合为：NAA0.5mg/L+6-BA1.5mg/L+活性炭1.0g/L。2.1/2MS培养基对两个杂交组合后代的原球茎增殖与分化效果最好。2,4-D和KT对原球茎分化作用不显著，6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L对增殖分化效果最佳；使用有机添加物对原球茎增殖以椰汁增殖效果最好，其次为香蕉泥、土豆汁；添加香蕉泥100g/L+椰汁50ml/L最利于原球茎的增殖与分化。切割大小和方式以1.0cm不切割较适合原球茎增殖。TDZ0.1mg/L较适合原球茎的分化。原球茎分化最佳组合为：1/2MS+NAA0.5-2.0mg/L+TDZ0.15mg/L+土豆汁90g/L。3. MS培养基最适合壮苗生根培养，其次是KC和1/2MS培养基。壮苗生根加入0.2-0.5mg/LGA3，NAA1.0-2.0mg/L效果较好。有机添加物以土豆汁60g/L+香蕉泥60g/L效果最好。正交组合以KC+NAA1.5mg/L+GA30.1-0.5mg/L+香蕉泥90g/L对杂交兰生根效果较好。4.移栽时选取壮苗180d的小苗以及炼苗一周较好，基质以松树皮：珍珠岩=2：1较适合杂交小苗移栽。