【摘 要】
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目的:研究脂氧素A4(LXA4)及脂氧素A4受体(ALXR)在慢性鼻-鼻窦炎上皮-间质转化(EMT)中的作用,进一步探究慢性鼻-鼻窦炎黏膜组织重塑的发病机制。方法:(1)免疫组化、RT-PCR及Western bl
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目的:研究脂氧素A4(LXA4)及脂氧素A4受体(ALXR)在慢性鼻-鼻窦炎上皮-间质转化(EMT)中的作用,进一步探究慢性鼻-鼻窦炎黏膜组织重塑的发病机制。方法:(1)免疫组化、RT-PCR及Western blot检测慢性鼻-鼻窦炎患者鼻黏膜中ALXR的表达变化。(2)体外研究LXA4及ALXR在鼻黏膜上皮-间质转化中的作用。体外培养鼻黏膜上皮细胞(HNEp C),分别加入0、0.1、1、10、100ng/m LTGF-β1,诱导上皮向间质转化;TGF-β1诱导30min后,分别加入0、1、10、100、200 n M的LXA4,显微镜下观察细胞的形态变化,RT-PCR、Western blot测细胞表面标志E-cadherin(上皮细胞标志)、α-SMA(肌成纤维细胞)的表达变化,ELISA检测细胞培养液中Ⅲ型胶原蛋白的含量;预先用ALXR拮抗剂BOC-2处理30min后,再依次加入LXA4及TGF-β1,观察LXA4对TGF-β1诱导的HNEp C发生EMT的影响。结果:(1)免疫组化示ALXR表达于鼻黏膜上皮和腺上皮细胞,在慢性鼻-鼻窦炎患者中为强阳性。RT-PCR、Western blot示慢性鼻-鼻窦炎患者ALXR的表达均高于对照组患者,而在慢性鼻窦炎伴鼻息肉中却低于单纯鼻窦炎患者,均有统计学差异(P<0.05)。(2)一定浓度的TGF-β1能够诱导鼻黏膜上皮细胞发生EMT,致细胞形态、功能及表面标志均发生变化;TGF-β1作用120h,细胞变得疏松,部分由扁平状变为长梭形,E-cadherin表达减少,α-SMA表达增加,且培养皿中Ⅲ型胶原蛋白的沉积量也随着观察时间的延长逐渐的增加。(3)一定浓度的LXA4可抑制TGF-β1诱导的EMT,阻止细胞转化为梭形,抑制α-SMA的表达,而ALXR拮抗剂BOC-2可减弱LXA4的抑制作用,说明LXA4对TGF-β1诱导鼻黏膜上皮-间质转化的抑制作用至少有一部分是通过该受体实现的。结论:(1)ALXR在慢性鼻-鼻窦炎患者中高表达。(2)一定浓度的TGF-β1能够诱导鼻黏膜上皮细胞发生EMT,致细胞形态、功能及表面标志均发生变化。(3)一定浓度的LXA4可通过ALXR抑制TGF-β1诱导的鼻黏膜上皮-间质转化。(4)因此LXA4及ALXR可能参与黏膜组织的重塑,与慢性鼻-鼻窦炎的病理生理过程密切相关。
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