用斜入射光反射差法无标记高通量检测生物芯片的探索研究

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sargelee
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生物大分子相互作用是生命科学中十分重要的研究内容之一,建立和发展无标记高通量的分析和检测技术,已成为生物大分子之间相互作用研究进一步取得重大进展的关键之一。本论文以斜入射光反射差法(Oblique-IncidenceReflectivity Difference,OI-RD)为主要研究对象,在改进现有OI-RD实验装置的同时,探索用OI-RD无标记高通量探测生物芯片和实时监测生化反应的动态过程。并取得了如下主要成果:   1、在调研和实验的基础上,采用光电二极管线列和光栅尺定位两种方案,对原有单光点二维扫描装置进行改进,实现了OI-RD对无标记生物芯片的高通量检测,在30分钟时间内,扫描检测1000个样点的生物芯片,使扫描检测速度提高了十多倍。装置在快速扫描的高通量检测方面还有较大潜力,证明了用OI-RD无标记高通量检测生物芯片的可行性。已申请发明专利1项。   2、用OI-RD检测和分析不同浓度20碱基的寡核苷酸生物芯片及其杂交反应过程,同时获取OI-RD的实部和虚部两路信号。实验结果表明,OI-RD不仅可以无标记的检测核酸的不同浓度,而且可以无标记的辨别核酸的杂交反应是否发生。   3、用OI-RD检测不同浓度Mouse IgG和Rat IgG与Goat Anti-Mouse IgG的抗原-抗体结合过程,实验结果表明,OI-RD不仅可以无标记的检测IgG蛋白的不同浓度,而且可以无标记的辨别抗原和抗体的结合是否发生。   4、初步搭建了用于研究生物分子结合与反应过程的OI-RD实时监测装置,并监测了Rabbit IgG与环氧乙基活化基片、寡核苷酸与环氧乙基基片、寡核苷酸之间结合与反应的过程。得到OI-RD信号相对时间坐标变化的结合与反应动态过程曲线。初步证明OI-RD方法可以实时监测生物大分子的结合与反应动力学过程。
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