【摘 要】
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【目的】研究P-gp抑制剂维拉帕米增强人参皂苷Rg3在Caco-2细胞模型中跨膜转运的作用。 【方法】体外培养Caco-2细胞，通过MTT法确定Rg3和维拉帕米对Caco-2细胞的无毒性浓度
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【目的】研究P-gp抑制剂维拉帕米增强人参皂苷Rg3在Caco-2细胞模型中跨膜转运的作用。 【方法】体外培养Caco-2细胞，通过MTT法确定Rg3和维拉帕米对Caco-2细胞的无毒性浓度范围。摸索建立Caco-2细胞模型的方法、培养条件及完整性评价方法。建立HPLC检测Rg3浓度的方法学。在Caco-2细胞模型中研究维拉帕米对Rg3跨膜转运的影响。 【结果】 MTT法显示浓度为100μmol/L以下的Rg3及10000μmol/L以下的维拉帕米未显示明显细胞毒性（P＞0.05）。Caco-2细胞模型培养21-24d，TEER值>500Ω·cm2，苯酚红通透性实验Papp＜10-7，考虑Caco-2细胞模型可以用作药物转运实验。通过色谱扫描确定Rg3检测波长为203nm，维拉帕米及Hank’s液对检测没有干扰。Rg3标准曲线为A=7108.5C+11542，R2=0.9998，在浓度1-100μmol/L范围内线性关系良好。日内精密度、日间精密度均小于4％。长期药物损失率为4.17%。转运实验中，Rg3与Ver联合组各组Pratio值分别为1.25、1.28、1.34，Rg3对照组为23.28，Rg3+Ver联合组各浓度组和对照组之间差异具有显著统计学意义（P＜0.01）。 【结论】1、确定了人参皂苷Rg3和维拉帕米对Caco-2细胞无细胞毒性的药物浓度范围。2、TEER值测定和苯酚红通透性实验可评估Caco-2细胞模型用作药物跨膜转运实验的可行性。3、HPLC检测Rg3浓度的方法灵敏，简便，可靠，准确度与长期稳定性符合要求。4、Caco-2细胞模型跨膜转运吸收实验中各比例的维拉帕米均能促进人参皂苷Rg3的吸收，该作用机制与维拉帕米抑制P-gp的药物外排作用有关。
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