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经导管血管栓塞术(transcatheter arterial embolization, TAE)是在X线透视监视下,将能够引起血管腔暂时性或永久性阻塞的物质,通过导管释放入病变血管或病变的供血动脉内使之闭塞,从而达到预期治疗目的的技术,使用抗癌药物或药物微球进行栓塞可起到化疗性栓塞的作用。由于靶向微球经动脉栓塞给药系统的作用特点,其药代动力学研究比较特殊和困难,尤其是带药微球经动脉栓塞后,靶组织局部的药物浓度检测一直是个难题,主要原因在于待测组织的取材方法不能排除血管内残留药物的影响。为阐明带药微球动脉栓塞后,靶组织局部的药物释放特征以及吸收程度。本实验截取雄性家兔股动脉,以利福平海藻酸钠微球栓塞剂(rifampicin sodium alginate microsphere embolic agents, RFP-KMG)填充,制成生物膜囊袋,将药物囊袋包埋入肝脏,定时取出包埋药物囊袋,检测囊袋剩余药量、肝脏局部组织梯度浓度、外周血药浓度。模拟带药微球栓塞后,经动脉血管壁局部吸收释放过程。RFP-KMG由公司提供,在体外释放试验条件(0.4%牛血清白蛋白PBS缓冲液；37℃；1)下3d左右可达到释放平台期,3d到21d左右样品释放基本稳定,到28d时释放突然增加,在28d取样时,透析袋内微球样品已完全溶散,呈浓药液样,28d释放试验末期样品释放呈突释样。本课题通过制作带药微球栓塞剂动脉囊袋,将其包埋入肝脏,准确考察其局部组织药物浓度及释放特征,建立“带药微球经动脉栓塞给药系统”作用的局部组织内药物浓度的动物实验检测方法。1肝脏包埋动物实验取雄性新西兰白兔30只,正常饲养,随机分为5组,每组6只(RFP-KMG实验组5只；海藻酸钠微球栓塞剂空白对照组1只),实验兔称重,麻醉后大腿内侧备皮,分离股动脉,取约3cm股动脉血管,实验组填充入定量的RFP-KMG,空白对照组填充入定量的海藻酸钠微球栓塞剂,两端结扎,制成生物膜囊袋,生理盐水浸润备用,实验兔胸腹部备皮,上腹部横向切口,暴露出肝脏,迅速将囊袋包埋入肝脏,用明胶海绵压住止血,腹部创口缝合,正常饲养。按时间点耳缘静脉取血,分别于1d、3d、1w、2w、1m取出动脉载药囊袋,并以囊袋包埋点为中心,梯度取肝脏组织。2生物样本液相条件建立HPLC测定血浆样本、组织样本中利福平的分析方法,采用Diamonsil ODS-2(4.6×250mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.075mol·L-1磷酸二氢钾溶液-1.0mol·L-1枸橼酸溶液(30：32：36：4),流速为1.0ml·min-1,柱温35℃,检测波长254nm,进样量：10μL。结果：方法学考察中精密度、重复性、稳定性及回收率试验中利福平含量的RSD均小于5%,符合实验要求。利福平峰分离良好,灵敏度高,样品中利福平的理论塔板数均大于3000,保留时间为15.54±0.07min,与相邻色谱峰的分离度均大于1.5,可用于药动学研究。3RFP-KMG代谢研究HPLC法测定血浆样本、组织样本、载药囊袋中利福平的浓度,所得血药浓度数据采用PKSolver2.0药动学软件对其自动拟合处理,以理论血药浓度值与实验测定值的相关系数最大和AIC最小作为判断标准,选择权重和最佳房室模型。结果表明,药物微球动脉囊袋包埋后,在兔体内的房室模型符合二房室开放模型。以囊袋包埋肝脏点为中心,肝脏近端浓度>中端浓度>远端浓度。包埋1d后,代谢剩余百分率为(74.59±1.48)%；包埋3d后,代谢剩余百分率为(52.56±1.24)%；包埋1w后,代谢剩余百分率为(33.11±1.95)%；包埋2w后,代谢剩余百分率为(19.48±1.87)%；包埋1m后,代谢剩余百分率为(1.34±0.65)%。