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目的：观察复方扶芳藤合剂含药血清对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)增殖的影响，并探讨其分子机制。 方法：1.分别采用密度梯度离心法和全骨髓贴壁法分离4周龄SPF级SD大鼠的骨髓间充质干细胞。检测骨髓间充质干细胞的生物学特性：进行形态学观察（光镜）；细胞活性检测；对第2，3，4，5，6代MSCs应用MTT法测定生长曲线，分析MSCs的生长规律；细胞的冻存和复苏。通过诱导使MSCs分化为成骨细胞（von Kossa染色法）；免疫细胞化学染色法检测细胞层粘连蛋白表达；2.将250g左右SD雄性大鼠随机分为复方扶芳藤合剂灌胃组和生理盐水灌胃组，制备血清。用2组血清干预MSCs的生长，MTT法检测两组血清对MSCs增殖的影响。RT-PCR法检测两组血清对Notch1基因表达的影响；Western blot法检测两组血清对NOTCH1蛋白表达的影响。 结果：1.原代培养的骨髓间充质干细胞接种24小时后开始贴壁生长，形态为均匀成梭形，并由最初典型的集落生长，逐渐融合成片，呈放射状或漩涡状生长，符合MSCs生长的特性。采用全骨髓贴壁法分离的原代MSCs，生长增殖迅速，10-14天MSCs融合接近80％，传代培养生长良好；而采用密度梯度离心法分离的MSCs，生长增殖较慢，17-20天MSCs融合才接近80%；2. MSCs生长曲线呈S型，由生长曲线分析可知，传代的MSCs在培养第3-7天为高速生长期，MSCs在第3-6代生长旺盛；3.免疫细胞化学染色显示所培养的细胞层粘连蛋白表达呈阴性，von Kossa染色后细胞表现为黑色的致密结节，证实培养的细胞为骨髓间充质干细胞；4.与生理盐水对照组相比，复方扶芳藤合剂含药血清可以明显促进MSCs的增殖（P<0.05）；5.与生理盐水对照组相比，复方扶芳藤合剂含药血清可以明显促进 Notch1基因的表达（P<0.05）；6.与生理盐水对照组相比，复方扶芳藤合剂含药血清可以明显促进NOTCH1蛋白的表达（P<0.05）。 结论：1.两种方法均可分离培养出较纯化的MSCs，但全骨髓贴壁培养法简单易行，原代培养周期较短，效率高。全骨髓贴壁培养法可以分离、纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞，所培养的MSCs体外生长稳定、增殖速度快、贴壁率高、可连续传代，可用于MSCs功能及应用的进一步研究；2.复方扶芳藤合剂含药血清具有促进MSCs增殖的作用。复方扶芳藤合剂含药血清可通过激活Notch1基因并促进其蛋白的表达从而促进MSCs的增殖。