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目的明确骨髓基质细胞(BMSCs)与神经干细胞(NSCs)两细胞接触、非接触共培养对BMSCs分泌中性粒细胞趋化因子-3(CINC-3)的影响,并研究CINC-3对新生大鼠海马来源的NSCs存活、增殖及分化的影响,深入探讨BMSCs通过CINC-3调控NSCs的存活、增殖及分化情况。方法1 BMSCs与NSCs共培养对CINC-3分泌的影响:为NSCs组、BMSCs组、接触共培养组和非接触共培养组,采用ELISA试剂盒检测各组CINC-3的分泌情况,以明确BMSCs与NSCs共培养对CINC-3分泌的影响;2 CINC-3对NSCs存活、增殖的影响:将稳定传2~3代后的NSCs用于实验,分为对照组和CINC-3组,通过MTS检测细胞的活力,明确CINC-3对NSCs存活的的影响,并选用MTS检测结果中NSCs细胞活力最佳的CINC-3浓度进行下一步实验,通过细胞生长曲线观察细胞存活及增殖的情况,通过免疫荧光染色法及RT-PCR检测NSCs巢蛋白(Nestin)的表达情况,以明确CINC-3对NSCs增殖的影响;3 CINC-3对NSCs分化的影响:将稳定传2~3代后的NSCs用于实验,分为对照组和CINC-3组,培养7d,通过免疫荧光染色法、RT-PCR测定神经干细胞标志物巢蛋白(Nestin)、神经元标志物微管相关蛋-2(MAP-2)、星形胶质表面标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、少突胶质表面标记物O4的表达情况,以明确CINC-3对NSCs分化的影响;4采用SPSS21.0软件包处理数据,实验结果用x±s表示,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果1 BMSCs与NSCs共培养促进CINC-3的分泌,接触共培养组、非接触共培养组及BMSCs组较NSCs组的CINC-3分泌量均升高,且差异均有统计学意义(P<0.05);接触共培养组及非接触共培养相比,接触共培养组分泌CINC-3的量更多,差异有统计学意义(P<0.05);而非接触共培养组与BMSCs组之间差异无统计学意义(P>0.05),其中接触共培养组的CINC-3分泌量最高;2 CINC-3对NSCs存活影响:MTS检测发现1ng/ml CINC-3组的细胞活力较对照组差异无统计学意义(P>0.05),5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml CINC-3组的细胞活力较对照组均增强,差异有统计学意义(P<0.05),其中10ng/ml CINC-3组活力最佳,20ng/ml CINC-3组较10ng/ml CINC-3组则差异无统计学意义(P>0.05);3 CINC-3对NSCs增殖影响:免疫荧光染色显示CINC-3组的Nestin阳性细胞的比例较对照组显著增多,CINC-3组Nestin阳性细胞数目较对照组显著增多,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测CINC-3组细胞Nestin表达水平明显上升,表达量明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);4免疫荧光染色发现CINC-3组分化7d,星形胶质细胞标志蛋白GFAP,神经元标志蛋白MAP-2和少突胶质细胞的标志蛋白O4表均达显著增高,表达量明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测发现CINC-3组仍表达Nestin,但表达水平明显下降,表达量明显低于对照组(P<0.05),而MAP-2、GFAP的m RNA表达水平显著增高,表达量明显高于对照组(P<0.05)。结论1 BMSCs与NSCs接触共培养能够促进BMSCs对CINC-3的分泌;2 CINC-3对海马来源的NSCs具有促进其存活和增殖的作用;3 CINC-3对海马来源的NSCs具有促进其向星形胶质细胞及神经元分化的作用。图 9 幅;表 4 个;参 148 篇。