论文部分内容阅读
灵芝是著名的高等药用真菌,在亚洲主要分布于中国、朝鲜半岛、日本等地,早在两千多年前灵芝就被我国人民所熟悉并采集使用。研究表明,灵芝三萜是灵芝中主要活性成分之一。近年来有不少文献报道,灵芝三萜类化合物具有很强的药理活性,如具有保肝抗肿瘤、抑制组胺释放等作用。而且目前临床上已经利用灵芝作为一种主要的鹅膏中毒的治疗方法,但对其机理尚缺乏研究。本实验用提取出来的灵芝三萜来治疗α-鹅膏毒肽中毒的小鼠,从自由基和抗氧化活性方面来探讨灵芝解毒的机理。将灵芝子实体粉碎后,先经95%乙醇回流提取,再用氯仿萃取,即得到中性提取物,然后经碱提酸化处理,再用氯仿萃取后,即得到酸性提取物,经薄层层析,硅胶柱层析及高效液相色谱分析等手段获得较纯的灵芝三萜。对灵芝分离纯化各个阶段得到的组分及灵芝三萜进行药理实验,通过设立小鼠鹅膏毒肽中毒组、中毒后灵芝活性成分灌胃组、生理盐水对照组做比较,然后测定处理前后血清中丙氨酸转移酶ALT、天冬氨酸转移酶AST,以及肝脏组织中的超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、丙二醛MDA,结果表明分离出的各个组分,尤其是灵芝三萜,对由鹅膏肽类毒素所致肝损伤有保护作用。在用α-鹅膏毒肽处理小白鼠后,其ALT、AST、MDA都相对正常对照组,有明显的升高,而当用灵芝各组分灌胃后,ALT、AST、MDA均又有所降低,尤其是灵芝三萜高剂量(Fr. LZA高剂量)灌胃组(200mg/kg),最接近正常对照组,其次是灵芝水提液灌胃组（Fr.W灌胃组)、灵芝醇提液灌胃组(Fr.E灌胃组)。在用α-鹅膏毒肽处理小白鼠后,其SOD、CAT都相对正常对照组,有明显的降低,而当用灵芝各组分灌胃后,均又有所升高,尤其是灵芝三萜高剂量灌胃组(Fr. LZA高剂量)灌胃组(200mg/kg),最接近正常对照组,其次是灵芝水提液灌胃组(Fr.W灌胃组)、灵芝醇提液灌胃组(Fr.E灌胃组)。说明灵芝三萜对由鹅膏肽类毒素所致小鼠的这些酶活性的降低,有明显的修复作用。因此,灵芝三萜对鹅膏毒肽所致肝损伤有一定的保护作用。通过观察比较正常对照组,α-鹅膏毒肽中毒组,中毒后灵芝三萜灌胃组的各小鼠肝细胞超微结构,结果表明,α-鹅膏毒肽中毒组与正常对照组比较有显著性差异,大的空泡化显而易见,细胞器受到严重破坏。而灵芝三萜的干预则明显减轻了其破坏程度,而且可见肝细胞再生现象,肝细胞超微结构接近正常对照组图。说明灵芝三萜能修复由鹅膏毒肽中毒后小鼠肝细胞超微结构的破坏。因此,灵芝三萜对鹅膏毒肽所致肝损伤有一定的保护作用。