目的:1.研究叶酸、mi R-375对宫颈癌细胞Siha的生物学特性的影响;2.验证课题组前期叶酸对宫颈癌细胞Siha中mi R-375的表达的影响;3.研究叶酸及mi R-375对宫颈癌细胞Siha中DNMT1表达的影响。方法:1.使用含有不同浓度叶酸的培养基培养宫颈癌细胞Siha,以及使用mi R-375模拟物、mi R-375抑制物转染宫颈癌细胞Siha,通过划痕实验分别观察96孔板中mi R-375inhibitor、mi R-375 mimics、对照组中细胞的侵袭迁移能力,每组6个孔,共18孔,使用Cytation5细胞成像微孔板检测系统分别采集每孔在0h、48h的图像,通过image J软件对采集到的图像进行处理分析,计算每孔在48h时的伤口愈合百分比=(最初始划痕面积-某时间点的面积)/最初始划痕面积;2.通过划痕实验分别观察96孔板中含有叶酸浓度分别为500nmol/L、250nmol/L、100nmol/L、50nmol/L、20nmol/L、0nmol/L的培养基中细胞的侵袭迁移能力,每组3个孔,共18孔,同样使用Cytation5细胞成像微孔板检测系统分别采集每孔在0h、48h的图像,通过image J软件,计算每孔在48h内的伤口愈合百分比;3.使用含有不同浓度叶酸的培养基常规方法培养宫颈癌细胞株Siha,通过实时荧光定量PCR技术检测mi R-375的表达水平,根据各组Ct值计算每个样本的2-??Ct值;4.使用mi R-375 inhibitor、mi R-375 mimics、mi R-375NC转染宫颈癌细胞,48小时后,经免疫荧光技术,使用Cytation5细胞成像微孔板检测系统计数每孔采集到的图像,计算对照组、mi R-375 inhibitor组、mi R-375 mimics组、mi R-375阴性对照组图像中红色荧光表达强度均值(每组6个孔);5.使用含有不同浓度叶酸的培养基常规方法培养宫颈癌细胞株Siha,经免疫荧光技术,使用Cytation5细胞成像微孔板检测系统采集96孔板中含有叶酸浓度分别为0nmol/L、20nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、250nmol/L、500nmol/L的培养基中的细胞图像,并计数其中每孔中红色荧光表达强度均值。结果:1.mi R-375 inhibitor组、mi R-375 mimics组与对照组伤口愈合百分比的均值分别为(40.6±5.6)%,(30.4±6.3)%,(36.5±3.4)%,结果有显著的统计学差异(P<0.05);2.叶酸浓度分别为500nmol/L、250nmol/L、100nmol/L、50nmol/L、20nmol/L、0nmol/L的培养基中宫颈癌细胞株的伤口愈合百分比均值分别为(20.9±4.7)%,(30.72±3.58)%,(32.5±2.5)%,(34.4±5.4)%,(38.2±7.2)%,(45.2±5.2)%,结果有显著的统计学差异(P<0.05);3.浓度分别为500nmol/L、250nmol/L、100nmol/L、50nmol/L、20nmol/L、0nmol/L的叶酸的培养基培养宫颈癌细胞株Siha,计算6组样本2-??Ct的均值分别为(1.0±0),(4.5±0.1),(8.6±0.4),(16.8±1.2),(18.6±2.0),(20.3±1.7),每两组间进行比较,均有统计学意义(P<0.05);4.对照组、mi R-375 inhibitor组、mi R-375 mimics组、mi R-375阴性对照组图像中红色荧光表达强度均值(每组6个孔),分别为(28465±3221),(29462±4578),(27641±2292),(28739±2374),每两组间进行比较,结果提示除对照组与mi R-375的阴性对照组之间无统计学差异,其余任何两组间比较均有显著统计学差异(P<0.05);5.叶酸浓度分别为0nmol/L、20nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、250nmol/L、500nmol/L的培养基中的细胞图像中每孔中红色荧光表达强度均值(每组3个孔),分别为25884±1134,26773±2145,28968±968,29625±1280,32114±2007,35568±666,每两组间进行比较,均有显著统计学差异(P<0.05)。结论:1.使用含有不同叶酸浓度的培养基培养宫颈癌细胞Siha,以及使用mi R-375inhibitor、mi R-375 mimics染宫颈癌细胞Siha后,通过划痕实验发现叶酸及mi R-375可以抑制宫颈癌细胞Siha的增殖、迁袭能力。2.在体外培养基中,叶酸可以促进宫颈癌细胞Siha中mi R-375的表达。3.叶酸以及mi R-375可以抑制宫颈癌细胞Siha中的DNMT1的表达。