白僵菌NDBJJ-BFG菌株的分离鉴定及其对马铃薯甲虫的生防作用评价

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从新疆本地感病的马铃薯甲虫分离到一株高毒力白僵菌,研究了其侵染过程及感染后的马铃薯甲虫组织病理学变化,通过测定其与马铃薯田间常用农药的相容性,选择合适的混用农药进行了田间的防效评价。主要研究结果如下:1.从新疆从新疆乌鲁木齐县中梁村、五一农场、吐鲁番亚尔果勒村等地分离获得4株病原真菌。通过形态学和分子生物学鉴定,菌株TLF-Me01与贵州绿僵菌(Metarhizium guizhouense)相似性达99%,菌株WY-Me01和BFG-Me01与金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)相似性均达99%,菌株NDBJJ-BFG与球孢白僵菌(Beauveria bassiana)相似性达99%。2.室内毒力测定明确了4株致病菌菌株对马铃薯甲虫幼虫各龄期均表现出很强的致病能力。NDBJJ-BFG菌株的致病力最强,接种9 d后,马铃薯甲虫幼虫的累计死亡率达88.39%100%,蛹及成虫的累计死亡率达83.89%93.33%。在1.0×108孢子/mL浓度下对1-4龄幼虫的LT50分别为3.7 d、5.9 d、6.2 d和6.8 d。3.运用扫描电镜和苏木精-伊红染色法研究了菌株感染马铃薯甲虫幼虫的过程。在接种24 h后分生孢子开始萌发并由芽或分生孢子产生的附着胞侵入表皮。48 h后,菌丝已经进入了血腔内;72 h时,体表芽管生长迅速,并形成菌丝在寄主体表蔓延;此时菌丝在体腔大量繁殖,使真皮层溶解消失,肌肉组织发生断裂,脂肪组织溶解,部分菌丝使肠壁肌肉破坏,肠壁细胞与中场细胞分离,气管变形;96 h后,大量菌丝在体表相互缠绕,菌丝上已开始产生新的分生孢子和分生孢子梗,虫体内部组织结构被破坏;120 h时大量的菌丝穿透体壁,菌丝体上已密集地萌生出很多分生孢子梗;144h时形成大量的分生孢子。4.农药相容性测试结果表明,70%吡虫啉水分散粒剂对菌株影响较小;20%灭多威乳油、4.5%高效氯氟氰菊酯微乳剂,在低浓度下才能考虑和菌株NDBJJ-BFG进行混用,而3.2%阿维菌素乳油、40%辛硫磷乳油、80%多菌灵可湿性粉剂对菌株孢子萌发率及产孢量的抑制作用较强。41%草甘膦异丙胺盐对孢子萌发没有明显抑制,但其高浓度对菌落生长及产孢量均有抑制作用,不能够作为混用药剂。5.田间试验表明,药后12 d,孢子浓度为1×109孢子/mL、1×107孢子/mL和1×105孢子/mL对马铃薯甲虫幼虫最高防效为91%、80%和68%;药后9 d,对成虫的最高防效为58%、48%和42%;浓度为1×107孢子/mL+70%吡虫啉15000倍液和70%吡虫啉3000倍液,对马铃薯甲虫幼虫防效为92%和95%,对成虫防效为80%和85%。低浓度的吡虫啉增加了白僵菌NDBJJ-BFG感染能力,显示出白僵菌NDBJJ-BFG与低剂量吡虫啉混用防治马铃薯甲虫的良好应用前景。
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