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苦丁茶(Ilex latifolia Thunb)是中国一种传统的纯天然保健饮料佳品,来源为冬青科植物大叶冬青的叶,主要分布在西南地区及华南地区等地。苦丁茶中含有苦丁皂甙、氨基酸、维生素C、多酚类、黄酮类、咖啡碱、蛋白质等200多种成分。其成品茶清香有苦味、而后甘凉,具有清热消暑、降压减肥、抑癌防癌、抗衰老、活血脉等多种功效。近年来,国内外对苦丁茶化学成分研究日益增多,主要集中在加工成品茶和茶饮料等营养保健方面,但对苦丁茶的功能成分的研究还有待进一步深入探讨,以促进苦丁茶饮料资源利用的发展。用95%乙醇对苦丁茶原料进行加热回流提取,得到总提取物。总提取物经过分级萃取,得到四个部位(石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位)。对苦丁茶乙醇总提取物和各个部位进行抗氧化、抗补体、抗癌和抗炎等一系列的活性研究。综合评价四个部位的活性,结果表明苦丁茶乙醇总提取物经过分级萃取,其有效成分得到了较好的分离,主要活性成分集中在乙酸乙酯部位,因此选择乙酸乙酯部位进行进一步的分离纯化。对苦丁茶总黄酮、总皂苷、总生物碱和总多糖进行提取。黄酮类和皂苷类的分离是采用大孔吸附树脂以不同浓度的乙醇来洗脱而实现的。醇沉得到的多糖粗品用Sevege试剂脱去蛋白。使用不同的对照品来绘制标准曲线,从而测定四大类的含量,分别为总黄酮含量21.58%,总皂苷含量28.75%,总多糖含量24.55%,总生物碱含量12.67%。对提物分离得到的四大类进行了抗氧化、抗补体、抗癌和抗炎活性的研究,结果表明:经过大类提物分离后,苦丁茶的活性成分在各大类中发生了很大的变化。在抗氧化活性中,生物碱的总还原力最强;黄酮和多糖对DPPH自由基的清除能力较好;四大类对超氧阴离子自由基的清除力都比较低。在抗补体活性中,多糖具有很好的抗补体活性。在抗癌活性中,黄酮和皂苷表现出比较好的对Hela细胞增殖的抑制作用。在抗炎活性中,黄酮对LPS诱导RAW264.7细胞释放NO的抑制作用最好。对乙酸乙酯活性部位经各种柱色谱(硅胶柱、凝胶柱和ODS柱)及液相分析和制备,分离纯化得到了5个单体化合物,通过核磁谱1H-NMR,(13)~C-NMR,135-DEPT-NMR和质谱以及文献比对,鉴定结构分别为:(1)咖啡酸乙酯(2)熊果酸(3)绿原酸(4)3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(5)3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯。对乙酸乙酯活性部位分离得到的5个单体化合物进行了抗氧化、抗癌和抗炎活性研究,结果表明在抗氧化活性中,化合物2和化合物3的总还原力活性和对DPPH自由基的清除作用很好,所有化合物对超氧阴离子自由基的清除作用则均不太好。在抗癌活性中,化合物4和5表现出比较好的对Hela细胞的增殖抑制作用。在抗炎活性中,化合物1和2对显示出对RAW264.7细胞有一定的毒性作用,不适合进一步的抗炎活性研究;在抗炎活性实验中,结果表明其余3种化合物都显示出一定的抑制LPS诱导RAW264.7细胞释放NO的作用,且抑制作用强度具有浓度依赖性,化合物3表现出很好的抑制作用。