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目的:本实验以广西特色植物罗汉果为研究对象,从罗汉果果实中分离得到足量的高纯度罗汉果皂苷V单体。建立罗汉果皂苷Ⅴ(纯度≥98%)动物体内、体外的代谢实验方法,研究其体内外吸收与代谢成分,阐明体内外代谢特点与规律,为罗汉果皂苷V开发成功能食品和药物提供科学依据。 方法:甲醇浸提罗汉果果实,提取物过 D101大孔吸附树脂进行皂苷的富集。采用硅胶、HP-20ss、C18等分离材料,分离纯化罗汉果皂苷V和其他几个皂苷类成分,进一步通过制备液相制备得到大量纯度达98%的罗汉果皂苷V单体。按50 mg/kg剂量将罗汉果皂苷V纯品灌胃SD雄性大鼠,收集给药后大鼠的尿液、粪便、血液和各脏器组织作为生物样本。各生物样品进行纯化后,采用HPLC-ESI-IT-TOF-MSn技术检测其各代谢成分,利用岛津液质数据分析工作站对代谢产物进行分析和推导,鉴定结构,研究罗汉果皂苷 V的体内吸收代谢特点和规律。此外,将纯品罗汉果皂苷V臵于人工胃液中,37℃恒温水浴下降解,考察罗汉果皂苷V在0h、1h、2h、3h、4h这5个时间点的稳定性,继而了解罗汉果皂苷V口服后在胃液中的降解成分。罗汉果皂苷V在含有人的肠内菌的培养基中,厌氧条件,37℃下培养48 h,水饱和的正丁醇对样品进行萃取,应用液质联用技术检测分析代谢成分。应用大鼠肝S9体外孵化的方法模拟研究罗汉果皂苷V在肝脏中的代谢成分。 结果:从罗汉果中分离并鉴定了4个化合物,分别鉴定为罗汉果皂苷ⅡE、Ⅲ、Ⅳ、V。通过制备液相,制备得到1.72 g罗汉果皂苷V纯品(纯度≥98%)。通过罗汉果皂苷Ⅴ的体内代谢实验,从各生物样品中发现了罗汉果苷V代谢产物36个,其中尿液中5个,粪便中21个,血浆中1个,组织中25个。代谢产物结构都属三萜及其苷类,为苷Ⅴ的次生皂苷或苷元的氧化产物。在部分生物样品中仍可检测到原形的存在,在血液中可以检测到罗汉果皂苷ⅡE成分,推测其可能为吸收入血有效成分。罗汉果皂苷V在大鼠体内主要发生的代谢反应有脱糖基、异构化、羟基化等。体外试验发现罗汉果皂苷V在人工胃液和人的肠道菌群培养液中不稳定,降解反应类型有糖基化、异构化、羟基化等。但本试验中罗汉果皂苷V在大鼠肝S9体外孵化体系中并不代谢,估计是酶活力不够的原因。 结论:通过对罗汉果皂苷V单体在大鼠体内、体外吸收与代谢成分分析,了解了罗汉果皂苷 V的体内外代谢途径、特点及规律,弄清了罗汉果皂苷V的体内吸收入血成分,为罗汉果皂苷V的应用和开发提供科学依据。