嗡蜣螂属部分种类形态特征及DNA条形码研究

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嗡蜣螂属Onthophagus Latreille,1802隶属于鞘翅目Coleoptera金龟总科Scarabaeoidea金龟科Scarabaeidae金龟亚科Scarabaeinae,世界范围内已知2300余种。尽管前人对嗡蜣螂属种类的外部形态特征、生活习性和系统发育等方面做过大量研究,但对于中国分布的种类的形态学、性二型及雄性生殖器的研究还十分有限,尤其对嗡蜣螂属种类的DNA条形码在分类中的作用很少有研究报道。本研究手捡、陷阱诱捕收集辽宁、山东、内蒙古、河北、河南、甘肃多地嗡蜣螂样本,并进行种类鉴定。通过图像采集和特征比较对样本的外部形态、性二型、雄性外生殖器特征进行研究。应用PCR扩增技术获得14种嗡蜣螂63条线粒体COⅠ序列,联合GenBank数据库下载的21种嗡蜣螂24条COⅠ序列组成数据集,应用Mega5.0、DNAsp5.0等软件分析了核苷酸组成、变异位点数量及分布、种内与种间的遗传距离、单倍型多样性、核苷酸多样性,基于距离构建了NJ分子树,探讨了种内、种间的亲缘关系。形态学研究结果显示,嗡蜣螂属种间形态特征多数比较明显,并广泛存在性二型现象。性二型特征主要体现在雌雄个体间头面、前胸背板及前足胫节等部位。嗡蜣螂属种间雄性外生殖器形态差异明显,比其他外部形态特征更为稳定,是种间鉴别的可靠依据。DNA条形码研究结果显示:嗡蜣螂COⅠ序列A+T碱基含量为71.7%,具碱基偏向性,体现了昆虫线粒体碱基偏好性特点;单倍型多样性指数(Hd)为0.983±0.000001,35种87个嗡蜣螂个体分属于65个单倍型,说明嗡蜣螂具有较丰富的单倍型和分化现象;变异位点分布表明,50bp滑动窗口状态下,变异位点较多的区域在311bp和661bp附近,分别有45个和47个,75bp窗口状态下,则在286bp和661bp附近,分别有46个和47个,说明两滑动窗口下高变区分布相同;遗传距离分析表明,种内平均遗传距离0.88%,种间平均遗传距离为12.25%,种间遗传距离是种内遗传距离的13.9倍,符合阈值法则。遗传距离结果还显示,种内和种间遗传距离出现重叠区域,其中小驼嗡蜣螂种内出现明显分化,致使其种内遗传距离大于种间遗传距离。NJ树显示所有种的不同个体(包括雌雄个体)在分子树上分别优先聚集到本种分支下,支持率均高于99%,之后再与其他种的分支相聚,验证了形态学上种类鉴定的正确性。运用DNA条形码对嗡蜣螂属种类鉴定与基于形态学的鉴定结论一致,说明DNA条形码是嗡蜣螂属分类鉴定的有效手段。
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