白菜型油菜种质资源抗旱鉴定及相关基因筛选

来源 :青海大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:jerrykfczz
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为研究采集于青海省境内不同生态环境下的白菜型油菜种质资源的抗旱性差异,鉴定具有强抗旱性的优异白菜型油菜种质,并针对具有强抗旱性的种质资源进行抗旱相关基因的筛选鉴定研究,本试验收集不同生态环境下的白菜型油菜种质共35份,对其进行抗旱性鉴定、抗旱相关片段的分离鉴定及表达分析,主要结果如下:1、萌发期抗旱性鉴定试验根据各试验指标将35份白菜型油菜种质资源进行抗旱性排序后发现,35份不同的白菜型油菜种质资源的抗旱性存在一定差异;水培实验和苗期盆栽实验对抗旱较强的的种质资源进行进一步PEG胁迫验证实验表明,之前萌发期的抗旱鉴定真实有效,排名较前的的油菜品种在萌发期及苗期的抗旱性均强于其他种质资源;2、抗旱相关片段的分离及鉴定研究表明,抗旱相关基因的表达决定着植物的抗旱性强弱。从抗旱性最强的种质资源蜡烛油菜中筛选出干旱胁迫上调表达片段27个,下调片段17个。其中27个上调表达片段中21个被成功克隆,21个片段中,20个片段均与芸薹属植物高度相似。3、表达分析以β-actin作为内参基因,以前期筛选得到的X2-7片段序列设计引物,利用实时荧光半定量RT-PCR对31号蜡烛油菜中在20%浓度PEG胁迫下的子叶、叶、根和正常供水条件下的子叶、叶、根中X2-7基因片段的表达量进行分析。结果表明,在正常生长情况下X2-7基因片段在PEG胁迫下有一定量的表达,干旱胁迫诱导后上调表达,且在干旱胁迫的子叶中表达量较高。以上结果表明,X2-7基因片段受干旱胁迫的诱导而表达,是白菜型油菜资源节水抗旱的相关基因。
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