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目的:观察滋肾活血颗粒对肾纤维化模型大鼠血清及肾组织中羟脯胺酸(Hyp)含量及转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平的影响,探讨滋肾活血颗粒早期干预慢性肾功能衰竭肾纤维化进程的作用机制,为临床早期诊断和治疗肾纤维化提供理论及实验依据。 方法:健康普通级SD大鼠60只,体重180±10g,雌雄各半。随机抽取48只,采用单侧肾脏切除加两次尾静脉注射阿霉素注射液(ADR)的方法建立肾纤维化大鼠模型。设立病理模型组(模型组)、滋肾活血颗粒正常剂量治疗组(中药1组)、滋肾活血颗粒大剂量治疗组(中药2组)、卡托普利治疗组(西药组),所余大鼠设为空白对照组(空白组),共分为五组,每组12只。各组予正常饮食进水,并于造模后(第二次尾静脉注射阿霉素注射液后)开始,中药1组、中药2组和西药组分别给予相应药物灌胃治疗8周,其余各组同时予等量生理盐水灌胃。于第8周末收集24h尿液行尿蛋白定量(24hUpro)检测后,处死大鼠,腹主动脉取血检测各组大鼠的血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、Hyp情况;取左肾行Hyp检测、组织病理学检查及免疫组化检测转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。最后通过数据统计和图像分析以了解和比较各组情况。 结果:用药8周后,模型组大鼠的24hUpro、Cr、BUN、Hyp水平均较空白组明显升高。滋肾活血颗粒正常剂量治疗组上述指标较模型组和滋肾活血颗粒大剂量治疗组、西药组均有不同程度的改善,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而滋肾活血颗粒大剂量治疗组和西药组比较则无显著性差异(P>0.05)。肾脏病理显示空白组大鼠肾组织中肾小球、肾小管结构清晰,间质结构正常;模型组大鼠的肾纤维化病理表现明显,滋肾活血颗粒正常剂量治疗组肾组织纤维化病理表现较轻,滋肾活血颗粒大剂量治疗组及西药组大鼠肾组织纤维化病理表现较滋肾活血颗粒正常剂量治疗组明显。实验结果显示:Hyp和TGF-β1仅在空白组大鼠的血液中有少量表达;模型组表达则明显增加,明显高于其他组;西药组表达较空白组多,但较模型组为少。Hyp和TGF-β1的表达水平在中药2组与西药组间无差异性(P>0.05)。中药1组 Hyp的含量则较西药组和中药2组为低,差异显著(P<0.01);而TGF-β1的表达水平亦较西药组和中药2组为低,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论:(1)改良的肾单切加阿霉素注射液二次造模法可以更好地制造肾纤维化大鼠模型。(2)滋肾活血颗粒正常剂量组可有效降低阿霉素肾病肾纤维化大鼠24hUPro、Bun和Cr的水平,具有保护肾功能的作用。(3)滋肾活血颗粒正常剂量组能够抑制肾组织TGF-β1的表达、从而使病变肾组织ECM合成减少;同时能有效减少血清和肾组织Hyp含量。提示该方作用机制在于抑制TGF-β1表达和降低Hyp含量,减轻肾脏细胞增生及细胞外基质积聚等肾脏病理损伤,对肾脏重塑有正向调节作用,从而有效延缓肾纤维化的进程。(4)Hyp不但可以反映肾纤维化的程度,且与TGF-β1表达呈正相关;故有望作为TGF-β1在肾组织及血清表达情况间接观察的指标,从而为肾纤维化无创诊断及疗效评价提供新思路。(5)本次实验结果提示:在抗肾纤维化治疗过程中,滋肾活血颗粒正常剂量组疗效优于大剂量组。