[目的]自体软骨细胞植入(Autologous chondrocyte implantation,ACI)是一种很有前途的修复软骨缺损的方法。然而,关节炎症环境影响临床最终结局。干细胞诱导的脱细胞胞外基质(Decellularized extracellular matrix,DECM)已被用作间充质干细胞的培养基可改善细胞增殖和特异性的分化。在本研究中,我们使用DECM作为关节软骨细胞的体外增殖体系,并评估了 DECM增殖的软骨细胞对白细胞介素1β(Interleukin-1 β,IL-1β)或肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor α,TNF-α)所诱导的炎症环境的反应情况。[研究方法]使用细胞外基质(DECM)和常规组织聚苯乙烯培养板(tissue culture polystyrene plates,TCPS)培养新西兰大白兔膝关节软骨细胞。CCK-8法测定细胞增殖能力,并拍照。通过在软骨形成培养基中培养DECM和TCPS增殖的软骨细胞制作的高密度细胞团块,测定软骨基质的合成以及相关基因的表达。通过在软骨形成培养基中全程加入IL-1β或TNF-α,培养DECM和TCPS增殖的软骨细胞制作的高密度细胞团块。对比二者在炎症环境中,保护软骨细胞形成特异性软骨基质能力的作用。我们用IL-1β或TNF-α处理软骨细胞团块7天,来评价炎性细胞因子引发的软骨基质降解。最后,通过使用 抑制剂 NAM(Nicotinamide,尼克酰胺),来体现 SIRT1(Silent information regulator type 1,沉默信息调节因子1)的基因的作用。[结果]与常规组织聚苯乙烯培养基(TCPS)上培养的软骨细胞相比,DECM增殖的细胞增殖率显著增高。软骨细胞在高密度细胞团块中诱导软骨分化,两组的软骨分化潜力可以对比。在低浓度(1ng/mL)的两种炎性细胞因子IL-1β或TNF-α作用21天的情况下,DECM上生长的软骨细胞显示出比TCPS组更高的软骨基质合成水平,然而,高浓度(5ng/mL)的IL-1β则均抑制了两组的分化。我们用IL-1β或TNF-α处理软骨细胞团块7天,发现在DECM上生长软骨细胞中基质降解相关酶的基因表达显著低于在TCPS上培养的软骨细胞的表达情况。我们还发现,在IL-1β或TNF-α存在下,NAM对SIRT1的抑制作用完全抵消了 DECM对软骨细胞的保护作用,从而展示了软骨细胞中SIRT1基因的作用。[结论]综上所述,这项研究表明干细胞诱导的DECM是体外软骨细胞增殖的优良培养基质,因为它提高了软骨细胞对IL-1β或TNF-α所形成的炎症环境的抵抗能力。将干细胞诱导的DECM使用在基于ACI的临床软骨细胞组织工程中具有巨大潜力。