海藻糖是一种非还原性双糖,其独特的保护功能能使生物大分子(如蛋白质、核酸等)在外界高温、脱水等恶劣环境下免受伤害,近几年成为中外科学家研究的热点。目前我国对海藻糖的基础理论及应用方面的研究较多,但海藻糖的工业化生产在我国仍然是一个空缺,因此本文对从酵母中提取纯化海藻糖的工艺进行了研究。 从活性干酵母中提取海藻糖的方法有两种,乙醇提取和水提取。采用乙醇溶液为提取剂从活性干酵母中提取海藻糖的最佳条件是:乙醇体积分数40%的乙醇水溶液,80℃下与活性干酵母混合搅拌提取1.0h,料液比1:10(g干酵母/mL提取液)。本文同时对乙醇提取和水提取进行了比较。 活性炭是一种非常有效的吸附剂,被用于海藻糖提取液的脱色脱蛋白质的工艺中。对于海藻糖的乙醇提取液,活性炭的最佳工艺条件是:pH=4.1,1%的活性炭,搅拌转速100r/min,温度30℃,搅拌时间为25分钟。对于海藻糖的水提取液,实验证明不适于使用活性炭。 壳聚糖作为一种新型的蛋白质絮凝剂在废水处理及蛋白质回收等领域有着广泛的应用,受到人们的广泛关注。壳聚糖无毒无味,壳聚糖和蛋白质均可以回收利用。对于海藻糖的乙醇提取液,壳聚糖的最佳工艺条件是:pH=7.0,浓度为10mg/mL的壳聚糖溶液的加入量为0.2mL壳聚糖溶液/mL海藻糖提取液。对于海藻糖的水提取液,壳聚糖的最佳工艺条件是:pH=5.0,浓度为10mg/mL的壳聚糖溶液的加入量为0.07mL壳聚糖溶液/mL海藻糖提取液。实验证明壳聚糖达到了很好的脱除蛋白质的效果。 离子交换树脂有强的离子交换能力,它能除去溶液中的阴阳离子杂质以及离子型的色素,尤其是大孔型离子交换树脂,不但能吸附离子型的杂质,还能吸附各种非离子型杂质。因此使用离子交换树脂对海藻糖提取液进行脱盐脱色处理。首先从12种不同的树脂中筛选出001×7,201×7,D290树脂,将离子交换树脂组成离子交换柱,离子交换柱的最佳操作条件是:001×7(50mL)+D290(50mL)+001×7(20mL),提取液流速1mL/min。 海藻糖极易溶于水,但在乙醇中的溶解度很小,采用向海藻糖提取液中加入乙醇的结晶方法。 本文最后以啤酒废酵母为原料,比较了几种不同废酵母处理方法对海藻糖提取率的影响。