酿酒葡萄组织培养及再生系统的建立

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葡萄扦插技术不能获得大量的脱毒苗,传统的育种技术很难获得抗病葡萄品种,组织培养技术对葡萄无病毒株系建立、转基因葡萄育种研究提供了技术支持。而葡萄转基因工程目前发展的瓶颈是葡萄再生频率低,转化率低。本试验对酿酒葡萄赤霞珠、黑比诺和霞多丽离体茎尖、叶片和叶柄再生进行了研究,并对影响再生的基因型、植物激素和培养基组分等因素进行了探讨。主要取得了以下研究结果: 1.通过对赤霞珠、黑比诺和霞多丽离体茎尖繁殖体系建立的研究,获得茎尖增殖的最佳培养基配方。赤霞珠茎尖增殖培养基为MS+BA1.5mg/L+NAA0.02mg/L;黑比诺和霞多丽茎尖增殖培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.02mg/L。同时,获得了赤霞珠、黑比诺和霞多丽茎尖增殖芽生根培养基配方。赤霞珠茎尖增殖芽生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L;黑比诺和霞多丽茎尖增殖芽生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L。 2.通过对赤霞珠、黑比诺和霞多丽离体叶片、叶柄再生体系建立的研究,获得了赤霞珠、黑比诺和霞多丽离体叶片再生不定芽培养基配方。赤霞珠、霞多丽叶片再生培养基均为MS+TDZ4.0mg/L时,再生效果最好,其再生诱导率分别为18.1%、10.0%。黑比诺在MS+TDZ6.0mg/L+NAA0.05mg/L时,再生稳定,诱导率为6.7%。同时获得了赤霞珠叶柄离体再生不定芽的培养基为MS+TDZ4.0mg/L+NAA0.01mg/L,其再生诱导率为28.6%。获得了赤霞珠离体叶片不定芽生根苗的培养基配方,为1/2MS+IBA1.0mg/L。 3.试验结果表明,细胞分裂素BA对赤霞珠、黑比诺离体叶片愈伤组织诱导和不定芽再生基本无作用,细胞分裂素KT对赤霞珠、霞多丽离体叶片愈伤组织诱导和不定芽再生基本无作用。同时发现增加细胞分裂素的浓度和种类并不能提高离体叶片再生诱导率。外植体材料的选择对离体再生有较大的影响,带叶柄砧的叶片比不带叶柄砧的叶片诱导率要高。
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