煤矿作业工作诱导痰中转化生长因子-β1的表达水平

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接触生产性粉尘引起的尘肺病是我国职业性疾患中发病最严重的职业病。由于对尘肺病的治疗缺乏特异手段,尘肺的病死率极高,故而选取并监测对工人早期接尘危害敏感的指标,对高危人群早期脱离粉尘作业,延缓尘肺患者病程进展及延长寿命具有重要意义。近年来,呼吸道诱痰术在哮喘等疾病诊断和治疗方面应用广泛,日益受到国际上尘肺科研人员的高度重视。诱导痰分析有望作为一种用于定期监测接尘工人健康状况的手段,对传统监测方法进行补充和完善,有助于职业性肺部疾病的诊断。转化生长因子β在调控肺成纤维细胞增殖、分裂及胶原蛋白的合成与降解过程中发挥着重要作用,与肺纤维化的关系受到高度关注。其中,TGF-β1的致纤维化作用最强,在机体损伤修复、结构重建等方面的研究已成为焦点。   目的:本研究应用呼吸道诱痰术诱导不同接尘水平工人的肺深部痰液,同时测定痰液中TGF-β1的表达水平,分析其与工人接尘水平和尘肺病人肺组织病理变化的相关性,对职业史询问及环境监测方法等传统职业病检测方法进行补充和完善,为进一步加强和改进粉尘危害早期预防和控制措施提供新的思路和手段。   方法:   1.呼吸道诱痰:对非尘肺工人(包括分为不同接尘工龄工人及非接尘工人)115人和尘肺患者及其相应对照32人呼吸道诱痰。   2.痰液中细胞计数及分类:先用二硫苏糖醇处理痰液,再进行苏木精-伊红染色,计数细胞总数并分类计数,检测不同受试者主要的炎性细胞,分析各组间痰细胞学特征是否存在差异。   3.痰细胞内目的基因TGF-β1 mRNA表达水平的检测:提取痰细胞总RNA,逆转录为cDNA第一链,配制PCR反应体系,应用实时荧光定量PCR检测TGF-β1 mRNA的表达水平。   结果:   1.全部研究对象均能接受痰液诱导,成功率为98.6%。诱导痰液呈灰白色或黄色,粘稠状,接尘工人和尘肺患者痰液间或有黑色煤尘,痰液量约2ml。鳞状上皮细胞为(8.94±3.59)%,细胞活力为(78.32±6.50)%。   2.接尘工龄大于10年的工人巨噬细胞比例为(50.53±11.12)%,高于其他工龄组(P<0.05)。   3.接尘工龄大于10年的工人TGF-β1 mRNA表达量是相应对照的1.21倍(P<0.05)。   4.Ⅰ期尘肺患者、Ⅱ期及Ⅲ期尘肺患者TGF-β1 mRNA表达量分别是对照的1.53倍、1.52倍(P<0.05)。   结论:   1.呼吸道巨噬细胞比例的改变可能参与肺纤维化的发病过程;诱导痰方法可应用于粉尘作业工人痰细胞学变化的监测。   2.接尘工龄大于10年的工人、Ⅰ期尘肺患者与Ⅱ期及Ⅲ期尘肺患者与各自相应对照相比,TGF-β1 mRNA表达量含量增高,表明TGF-β1可能参与了尘肺病的发生发展,可作为筛查高危人群及生物监测的指标。  
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