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重金属是蓄积性污染物,可以在环境中长期积累不降解。传统的仪器型重金属检测方法在实际应用中存在诸多不足,不能满足当前重金属污染物快速检测的需要,而免疫学检测方法具有快速、高效、低成本等优点,近年来日益受到国内外的广泛关注。以本实验室成功制备的铅单克隆抗体为基础,选取杂交瘤细胞株7/4所分泌的抗体进行研究。在CELLine CL350细胞器中培养杂交瘤细胞株7/4分泌抗体,细胞培养上清液效价达1：320,亲和常数为3.96×108L/mol,特异性实验表明7/4与其它金属离子无明显交叉反应,具有较高的特异性。通过对盐离子强度等影响因子的研究建立了铅单克隆抗体ELISA检测体系,其检测条件为：包被抗原Pb-DTPA工作浓度0.728μg/mL,细胞培养上清液为80倍稀释,反应基质HBS中NaCl的离子强度为0moI/L,pH值为5.0。以Logit(B/B0)为纵坐标、pb2+浓度(μg/mL)的对数值为横坐标建立检测曲线,在0.1μg/mL-10μg/mL范围内呈显著线性关系,检测方程为Y=1.1801X-0.1643,相关系数R2=0.9926,IC50值为0.726μg/mL,检测极限值为0.048μg/mL,批内和批间变异系数分别为1.32%和2.58%。建立了泡桐、水杉中铅残留量检测曲线,间接竞争ELISA法检测南京栖霞铅锌矿区附近泡桐、水杉叶片,铅平均残留量分别为581.78mg/kg和308.88mg/kg.以本实验室成功制备的铜单克隆抗体为基础,选取杂交瘤细胞株DF4无血清培养所分泌的抗体进行研究。通过对盐离子强度、pH值等影响因子的研究建立了铜单克隆抗体ELISA检测体系,其检测条件为：包被抗原Cu-EDTA-BSA为80000倍稀释,抗体DF4为160倍稀释,反应基质HBS中NaCl的离子强度为0.15mol/L,pH值为5.0。以Logit(B/B0)为纵坐标、Cu2+浓度(μg/mL)的对数值为横坐标建立检测曲线,在0.1μg/mL～100μg/mL范围内呈显著线性关系,检测方程为Y=-1.0378X-0.1225,相关系数R2=0.9809,IC50值为0.769μg/mL,检测极限值为0.039μg/mL,批内和批间变异系数分别为1.53%和1.89%。超纯水、茶叶、小青菜添加回收率分别为100.36%、97.02%、95.86%。本研究所建立的重金属ELISA检测方法具有检测速度较快、费用低廉、简单易携、灵敏度高和选择性强的特点,为食品、环境的安全检测提供了重要的工具。