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阿霉素(DOX)是一种强效抗肿瘤药物,但因其缺乏肿瘤靶向性、毒副作用大,且易产生多药耐药(MDR),临床应用受到很大限制。康普瑞丁A4磷酸酯(CA4P)在1/10最大耐受量(MTD)的剂量下就可以选择性地产生抗肿瘤血管作用,但存在体内消除快、抗肿瘤作用不彻底的问题。鉴于此,我们构建了聚乙二醇单甲醚-聚乳酸(mPEG-PLA)囊泡,共同包载DOX与CA4P,以期通过增强渗透与滞留(EPR)效应使DOX与CA4P同时被动靶向于肿瘤组织,降低药物毒副作用,并着重考察DOX与CA4P共载后对提高肿瘤抑制率及逆转耐药的影响及作用机制。课题研究工作分为以下三部分：第一部分,采用开环聚合反应合成了不同亲／疏水链段比例的两亲性嵌段共聚物聚乙二醇单甲醚-聚乳酸(mPEG-PLA),并优选出具有合适fEO、能自组装形成囊泡,且具有较好载药能力的载体材料mPEG114-PLA162。采用溶剂蒸发法制备了空白聚合物囊泡及DOX和CA4P共载聚合物囊泡(Ps-DOX-CA4P),并对其形态、粒径、包封率及释放行为进行了考察。结果显示,空白自组装体外观呈类球形,形态规整,粒径约为50 nm,具有较大的亲水内核,外周由约10 nm的疏水层环绕,显示出典型的囊泡结构。Ps-DOX-CA4P具有与空白囊泡类似的大小及形态,能够共载DOX和CA4P, DOX的包封率大于90%,CA4P的包封率大于50%。药物释放的实验结果表明,DOX的释放速度略慢于CA4P。第二部分,以KB细胞为模型,考察了Ps-DOX-CA4P对肿瘤抑制的协同增效作用。MTT实验结果显示,空白聚合物囊泡无明显的细胞毒性,而Ps-DOX-CA4P与CA4P单载囊泡(Ps-CA4P)或DOX单载囊泡(Ps-DOX)相比,细胞毒性明显增加。建立裸鼠KB细胞移植瘤模型,考察聚合物囊泡的体内分布及药效。结果显示,聚合物囊泡所载的DOX在肿瘤组织的分布明显高于游离药(p<0.05),说明聚合物囊泡能够提高DOX在肿瘤组织的蓄积。Ps-CA4P能快速抑制肿瘤的生长,但作用短暂,Ps-DOX起效慢而作用持久,两者共载的囊泡Ps-DOX-CA4P(1:10)既能迅速起效,又能持续维持抗肿瘤的药效,抑瘤作用显著提高。CD31和Ki67免疫组化实验也显示,DOX与CA4P共载后,不仅能迅速破坏肿瘤血管,而且能持续抑制肿瘤细胞的增殖,产生协同抗肿瘤作用。第三部分,以阿霉素耐药MCF-7/ADR细胞为模型,通过细胞毒实验、细胞凋亡实验、DOX的细胞摄取、ATP酶的活性测定、细胞内ATP测定、胞内ROS测定及体外肿瘤球等实验研究,探讨了Ps-DOX-CA4P逆转耐药的作用机制。结果表明,Ps-DOX-CA4P能提高DOX对MCF-7/ADR细胞的细胞毒性和细胞凋亡率、促进MCF-7/ADR细胞对DOX的摄取、激活ATP酶的活性、降低细胞内ATP、提高细胞内的ROS,最终抑制了药物外排泵P-gp的功能而逆转耐药。同时,通过体外肿瘤球实验发现,Ps-DOX-CA4P能明显促进DOX渗透进入肿瘤球并且抑制肿瘤球的生长,提示Ps-DOX-CA4P有望在动物体内逆转P-gp介导的肿瘤耐药,增加化疗药的敏感性。