氨磷汀对宫颈癌Hela细胞放射增殖动力学影响的实验研究

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背景与目的:宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤。放射治疗是宫颈癌的重要治疗手段,配合手术和化疗能长期存活。但放化疗的毒副作用会影响到治疗的完成。氨磷汀是广谱细胞保护剂,通过清除自由基、保护细胞膜和DNA选择性保护正常组织。美国FDA批准用于防护顺铂化疗肾毒性及头颈部放疗的口腔反应,但因不能排除对宫颈癌细胞的保护作用,不推荐用于宫颈癌的治疗。本试验通过体外观察氨磷汀在宫颈癌细胞被射线照射后细胞增殖动力学的影响,探讨氨磷汀作为放射保护剂作用机制,为氨磷汀在宫颈癌放化疗中应用提供科学理论依据。方法:利用MTT法观察氨磷汀对宫颈癌Hela细胞的增殖影响。应用细胞克隆形成实验观察氨磷汀对宫颈癌Hela细胞放射敏感性的影响。流式细胞仪技术分析单用氨磷汀和氨磷汀联合6MV-X射线照射照射对宫颈癌Hela细胞增殖周期和凋亡的影响。随机设置单纯药物组、单纯放射组(R)和放射+药物组(D+R)进行克隆形成实验并绘制存活曲线。随机设置对照组(C)、药物组(D)、单纯放射组(R)和放射+药物组(D+R)分别于处理后用流式细胞仪检测各组细胞周期和凋亡情况。结果:1.MTT法检测结果显示,分别用氨磷汀(25、50、100、200、400、600μg/ml)作用于宫颈癌Hela细胞24和48小时后,细胞增殖无明显影响。2.用克隆形成实验结果绘制的存活曲线及相关参数显示,放射+药物组各个参数都相应小于单放组,单放组D0值(平均致死量)稍小于放射+药物组,说明加入氨磷汀培养后宫颈癌Hela细胞对放射的敏感性稍有增加,而且Dq值的减少提示氨磷汀能够降低宫颈癌Hela细胞对射线亚致死损伤修复的能力。3.流式细胞技术检测各组宫颈癌Hela细胞周期显示氨磷汀作用24小时Hela细胞出现G1期阻滞,72小时后出现G2期阻滞。凋亡结果显示:单药组为3.41%、4.36%、5.56%。单纯放疗组为:4.13%、5.37%、9.72%。药物+照射组:5μg/ml为5.41%、6.20%、12.04%:10μg/ml为7.63%、8.93%、13.37%:15μg/ml为8.40%、10.14%、15.30%。药物+照射组较单纯放疗组细胞凋亡略有增加(P>0.05)。结论:1.氨磷汀对宫颈癌Hela细胞无的保护作用。2.氨磷汀可提高宫颈癌Hela细胞的放射敏感性,其分子生物学机制可能是氨磷汀导致宫颈癌Hela细胞G2阻滞,促进宫颈癌Hela细胞凋亡。3.氨磷汀可作为放射保护剂用于宫颈癌的治疗。
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