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目的:抗核抗体(antinuclear antibodies,ANA)是系统性红斑狼疮(systemic lupuserythematosus,SLE)的重要自身抗体,其产生机制和生物学功能尚不明确。本课题主要对67种来自SLE患者的全人源单克隆抗体进行特异性评价并研究其对细胞增殖的影响。 方法:利用ELISA定量检测不同时间点收集的全人源单克隆细胞上清中的IgG含量,确定收集上清中有无IgG抗体。通过以HEp-2细胞为基质的间接免疫荧光实验检测67种单克隆抗体中是否有ANA;进而以OL细胞和OL/BDV细胞为基质进行间接免疫荧光实验检测全人源单克隆抗体并与HEp-2细胞结果比较。最后,选择确定为ANA的单克隆抗体进行MTT实验研究其对细胞增殖的影响。 结果:ELISA结果表明,细胞培养36h~48h后上清中的IgG抗体浓度最高。67种全人源单克隆抗体中有3种抗体与HEp-2细胞反应表现出特异的ANA荧光核型;OL细胞和OL/BDV细胞与阳性对照反应可出现与HEp-2细胞相似的荧光核型,但与全人源单克隆抗体反应未见与HEp-2细胞相同的典型荧光核型。MTT结果显示,浓度为50ng/mL的ANA,在24h时对HEp-2细胞、OL细胞和OL/BDV细胞的增殖无抑制作用,而在48h和72h时可见抗体对细胞的增殖有一定抑制作用;浓度为100ng/mL的ANA,在24h时对HEp-2细胞、OL细胞和OL/BDV细胞的增殖无抑制作用,在48h时可见抗体对细胞的增殖有一定抑制作用,而在72h时,3种抗体均可对细胞的增殖产生明显的抑制作用。 结论:67种SLE全人源单克隆抗体中有3种为抗核抗体,对癌细胞的增殖具有明显的抑制作用,并呈现浓度和时间依赖性。