【摘 要】
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睾酮(Testosterone, T)作为重要的性激素之一,其水平影响着机体的健康状况,对其含量的准确检测有助于临床相关疾病的辅助诊断。睾酮为小分子物质,具有不易从结合蛋白解离的特
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睾酮(Testosterone, T)作为重要的性激素之一,其水平影响着机体的健康状况,对其含量的准确检测有助于临床相关疾病的辅助诊断。睾酮为小分子物质,具有不易从结合蛋白解离的特性,加之血液中存在大量与其具有相似抗原活性位点的结构类似物或内源性物质,为其准确测定带来难度。本团队具有自主知识产权的GoldMag金磁微粒,因其具有较大的比表面积可以偶联足够的蛋白量,良好的超顺磁性保证其在外磁场中的分离操作,可实现高检测灵敏度和宽线性范围的检测需求,因而被用于检测血清样本微量物质如睾酮激素等的检测方法的建立。本研究以GoldMag金磁微粒作为睾酮抗原的固相载体,以辣根过氧化物酶(HRP)-鲁米诺(luminol)-过氧化氢(H2O2)化学发光系统作为检测体系。采用间接竞争法,建立了具有高灵敏度、特异性和重现性好,方便快捷的磁酶免化学发光法,经过评价方法实现了对临床样本人血清中总睾酮含量的测定。对体系免疫磁珠制备条件、免疫反应条件、抗原抗体用量、发光反应条件等进行研究和优化,最终建立体系的线性范围为0.05-5ng/ml,线性相关系数R2>0.99。方法学性能评估显示最低检测限为0.038ng/ml。用该方法与商业化的LIASON睾酮定量测定试剂盒(化学发光法)对临床120例健康人血清总睾酮含量进行检测并对比,两种方法的相关系数为0.97587,显示两种方法具有很好的相关性,表明建立的检测方法对临床样本人血清总睾酮的测定具有较高的准确度。
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